2 結果 2.1 急性毒性學實驗 通過急性毒性實驗得到LD50值分別為：CABBG 36.8937mg/kg，CAABG 89.23549mg/kg，CAIBG 767.7753mg/kg；95%可信區間分別為CABBG組32.0052～42.5289mg/kg，CAABG組76.7182～103.8025mg/kg，CAIBG組663.748～888.106mg/kg。各實驗組小鼠肉眼觀察，除肝臟增大外未見明顯變化，病理HE切片顯示肝細胞有不同程度的腫脹和空泡變。 2.2 外周血白細胞變化 實驗第5、7、9天CABBG、CAABG、CAIBG組小鼠外周血白細胞數、中性粒細胞數、單核細胞數均顯著增高，其中第7天、第9天，CAIBG組白細胞數、單核細胞數較陽性對照組rhG-CSF升高，差異有顯著性。

注：Note：*P＜0.05，compared with the normal control；**P＜0.05，compared with the positive control

注：Note：*P＜0.05，compared with the normal control；**P＜0.05，compared with the positive control

注：Note：*P＜0.05，compared with the positive control

2.3 脾臟、胸腺指數變化 實驗第5、7、9天，各組小鼠胸腺指數比較，差異無顯著性(P＞0.05)。各組小鼠給藥后，脾臟指數均增加。

注：Note：*P＜0.05，compared with the positive control

2.4 藥效學實驗病理組織學改變 脾臟：白髓、紅髓分界不甚清楚，紅髓內細胞數增多，與空白對照組比較，CABBG、CAABG、CAIBG組脾竇出現較多的巨核細胞；骨髓：實驗組小鼠骨髓細胞增生活躍，與空白對照組比較，CABBG、CAABG、CAIBG組的巨核細胞數增多，提示巨核細胞系增生活躍。 3 討論 多能造血干細胞具有多向分化的潛能，成年小鼠體內的多能造血干細胞主要分布在脾臟和骨髓［3］。本研究顯示，實驗第7天時，各實驗組白細胞總數、中性粒細胞數都較rhG-CSF高(P＜0.05)；實驗第7天、第9天，CAIBG升高外周血白細胞、單核細胞數明顯高于CABBG、CAABG和rhG-CSF(P＜0.05)，說明β-葡聚糖，尤其是CAIBG可刺激血液系統白細胞、中性粒細胞、單核細胞數不同程度的升高。實驗第7天，CABBG、CAABG、CAIBG組小鼠脾臟指數均與rhG-CSF差異有顯著性(P＜0.05)；第9天，CAIBG脾臟指數較rhG-CSF、CABBG、CAABG組高，統計學表明差異均具有顯著性(P＜0.05)。與成年小鼠體內造血干細胞的分布一致，實驗發現CABBG、CAABG、CAIBG組小鼠的組織病理學改變主要體現在骨髓和脾臟。與空白對照組比較，三組小鼠脾臟、骨髓巨核細胞數增多，CAIBG組要更明顯。因此，綜合外周血細胞數、脾臟指數、組織改變，我們推測β-葡聚糖在刺激小鼠外周血白細胞總數升高的過程中可能與刺激CFU-S增殖，向粒系、巨核系組細胞分化，進而生成粒細胞、單核細胞。 造血器官中基質細胞是造血微環境中重要的成分，與造血有關的基質細胞涉及到巨噬細胞、成纖維細胞、網狀細胞、淋巴細胞、內皮細胞和載脂肪細胞。其中，巨噬細胞被證明是在造血發生過程中有重要作用的一個微環境因素。巨噬細胞可通過細胞相互作用和分泌CSF、Epo、BPA、PGE和IL-1因子，調節所有四系血細胞的生長和分化［4］。以往研究證實念珠菌多糖可刺激巨噬細胞釋放細胞因子（CK）如IL-6、IL-8、IL-1、TNF等［5，6］。這些細胞因子可調控造血細胞的增殖活動：IL-1、TNF可刺激內皮細胞產生粒細胞集落刺激因子（G-CSF）及粒-巨噬系集落刺激因子（GM-CSF），G-CSF 和GM-CSF是使粒細胞和單核細胞的母細胞增殖分化的特異性誘導劑，并能刺激骨髓向外周血液釋放成熟的中性粒細胞，縮短中性粒細胞的成熟期［7］。同時，CSF可作用于粒-單系祖細胞（CFU-GM），誘導其增殖分化。IL-1還能激活干細胞從G0期進入增殖周期，擴大干細胞池；可為早期干細胞對CSF起反應做準備，并誘導輔助細胞產生CSF及其他CK，從而間接調節造血。 β-葡聚糖是念珠菌重要的抗原決定簇［8］，單核細胞、巨噬細胞上都存在β-葡聚糖的特異性受體［9］。白色念珠菌的三種溶解性的β-葡聚糖，在結構上都是符合單核細胞、巨噬細胞上β-葡聚糖受體對于配體的要求，即能被特異識別β-（1→3）和β-（1→6）糖苷鍵［10］。巨噬細胞作為一類抗原遞呈細胞（APC）攝取β-葡聚糖抗原，隨后誘導性的表達高水平MHC，MHC與Th細胞上的TCR和CD4相互作用。使Th細胞功能增強，IL-2分泌增多，IL-2又能保持T細胞的存活與增殖Th細胞被激活后刺激B細胞分化、增殖［11］。實驗中，小鼠脾臟指數的明顯增加、脾臟、骨髓細胞增生，說明了β-葡聚糖在升高外周血白細胞的同時，也對激活機體的整個免疫系統活性產生影響。因此，CAABG、CABBG、CAIBG升高小鼠外周血白細胞總數、中性粒細胞和單核細胞的作用可能與各組β-葡聚糖能不同程度的被單核、巨噬細胞識別從而產生一系列細胞因子，刺激造血系統和促進中性粒細胞增殖有關。 免疫調節劑作為一種免疫治療的藥物已經廣泛應用于臨床。多糖作為一類免疫調節劑，不僅毒副作用小，資源豐富，而且具有明顯的調節機體免疫系統的作用。本研究說明白色念珠菌β-葡聚糖尤其是不溶性的β-葡聚糖能顯著增加小鼠脾重，并能對抗由CTX所致的小鼠脾臟萎縮及白細胞水平降低，是一種較好的免疫增強物質。

1 Kouki Ishitani.Antitumor activity of polygalactosamine isolated from Paecilomyces sp.I-1 strain.J Pharmacobio Dyn，1988，11：58. 2 Gopal PK，Sullivan PA，ShepHerd MG.Analysis of wall glucans from yeast，hypHal and germ-tube forming cells of Candida albicans.J Gen Microbiol，1984，130：3295-310. 3 祝彼得.造血干細胞研究進展.重慶醫學院學報，1985，10：295. 4 徐豐彥，張鏡如.人體生理學.北京：人民衛生出版社，1989，952-970. 5 LI Min，CHEN Yun，SHAO Feng，et al.Isolation and Purification of the Alkali-soluble β –glucan from Cell Wall of Candida albicans.Chin J Dermatol，2000，33(5)：311-313. 6 Manners D J，Masson A J，Patterson J C，et al.The structure of beta-(1→3)- D-glucan from yeast cell walls.Biochemical Journal，2000，135：31-36. 7 楊藻宏.臨床用藥的藥理學基礎.北京：北京科學技術文獻出版社，1997，133. 8 Cassone A，Bistoni F，Cenci E，et al.Immunopotentiation of anticancer chemotherapy by Candida albicans，other yeasts and insoluble glucan in an experimental lympHoma model.Sabouraudia，1982，20(2)：115-125. 9 馬學清.中藥多糖的免疫增強作用.中國實驗臨床免疫學雜志，1996，8(2)：40. 10 LI Min，CHEN Qing，SUN Jun-jiang，et al.The effect of β–glucan of cell wall from Candida albicans on interleukin-6 and interleukin-8 production by human peripHeral blood mononuclear cells in vitro.J Clin Dermatol，2002，31(6)：349-350. 11 周光炎.免疫學，第6版.北京：人民衛生出版社，2002，87-100；105-115；148-160.