【摘要】目的 了解醫(yī)院常見臨床分離大腸埃希菌的分布情況及耐藥現(xiàn)狀，為臨床醫(yī)生合理使用抗菌藥物治療感染性疾病提供依據(jù)。方法 收集2008年1月1號(hào)至2009年12月31號(hào)臨床各科送檢標(biāo)本，采用美國(guó)德靈MicroScanWalkAway240全自動(dòng)微生物分析儀同時(shí)進(jìn)行菌株鑒定與藥敏測(cè)定，分析大腸埃希菌中ESBL s陽(yáng)性菌和陰性菌對(duì)抗菌藥物的耐藥情況。結(jié)果 共分離出大腸埃希菌965株，2008年度對(duì)慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素、妥布霉素、奈替米星、阿米卡星的耐藥率分別為：65.58％、60.15％、52.26％、40.94％、16.98％，11.21 %。2009年度慶大霉素、卡那霉素、鏈霉素、妥布霉素、奈替米星、阿米卡星的耐藥率分別為：68.08％、62.75％、56.96％、40．64％、20.68％，14.31 %。臨床分離的ESBLs大腸埃希菌對(duì)慶大霉素耐藥率最高，對(duì)阿米卡星敏感性最高。結(jié)論 各種藥物耐藥菌總數(shù)09年度比08年度有上升。大腸埃希菌對(duì)不同氨基糖苷類抗菌藥物的耐藥程度不同，臨床應(yīng)加強(qiáng)對(duì)細(xì)菌感染性疾病的耐藥性監(jiān)測(cè)，并根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理選擇抗菌藥，以指導(dǎo)臨床用藥。 【關(guān)鍵詞】大腸埃希菌 氨基耱苷類 耐藥性 超廣譜β內(nèi)酰胺酶 【Abstract】Objective To investigate the distribution of Escherichia Coli and antimicrobial resistance guide drug treatment and reasonable application of antibiotics in clinic. Methods The strain identification and drug sensitivity test was conducted by MicroScan WalkAway240 Full-automatic testing system of microbiology. ResultsAmong 965 isolates obtained，the resistance to Gentamicin， kanamycin， streptomycin， Tobramycin， netilmicin， amikacin， each was 65.58%，60.15%， 52.26%， 40.94%， 16.98%， 11.21% in 2008; but 68.08%，62.75%，56.96%，40.64%，20.68%，14.31%in 2009. ESBLs-producing Escherichia coli resistant to gentamicin highest rate， the maximum sensitivity to amikacin. Conclusio Drug Resistant Strain for aminoglycosides had the tendency of increase. Escherichia coli to different aminoglycoside antibiotic resistance in varying degrees.Clinical disease resistance surveillance should be strengthened，and a reasonable choice based on susceptibility test results antibacterial drugs to guide the clinical use of drugs. 【Key words】Escherichiacoli Ecoli aminoglycosides resistance ESBLs 國(guó)內(nèi)各地近年來(lái)報(bào)道大腸埃希菌(Escherichiacoli，E.coli)對(duì)氨基糖苷類藥物(aminoglycosides，AGs)的耐藥形勢(shì)逐漸嚴(yán)峻，其耐藥機(jī)制最重要的是產(chǎn)生氨基糖苷類修飾酶，此類酶作用于藥物特定的氨基或羥基，使藥物鈍化，使其降低或喪失對(duì)靶位核糖體的親和力，使細(xì)菌藥物存在的情況下仍能存活。隨著抗菌藥物廣泛的應(yīng)用，大腸埃希(ECO) 的耐藥率呈逐年上升趨勢(shì)，并出現(xiàn)對(duì)多種抗菌藥物耐藥，而由該菌引起的感染已成為臨床較為棘手的問(wèn)題。ECO的耐藥機(jī)制很多，如細(xì)菌產(chǎn)生滅活酶或鈍化酶對(duì)抗菌藥物的滅活與修飾；抗菌藥物作用靶位的改變；膜對(duì)抗菌藥物的通透性下降，藥物攝入減少；膜對(duì)抗菌藥物的主動(dòng)外排，藥物排出增加；細(xì)菌形成生物被膜；其中以產(chǎn)酶最為重要，針對(duì)ECO對(duì)臨床常用抗菌藥物的耐藥性及超廣譜口一內(nèi)酰胺酶(ESBLs)基因、氨基糖苷類、喹諾酮類抗菌藥物耐藥基因攜帶情況進(jìn)行研究。 為此本文對(duì)臨床分離的耐氨基糖苷類藥物對(duì)大腸埃希菌的耐藥進(jìn)行了相關(guān)分析，為臨床合理選用AGs藥物提供理論依據(jù)。 1 材料與方法 1.1材料 1.1.1菌株來(lái)源分離自本院2008年1月至2009年12月非腸道感染的住院病例大腸埃希菌965株(不含同一病人同一部位感染的重復(fù)菌株)，經(jīng)MicroScan WalkAway-40型全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀鑒定。大腸埃希菌質(zhì)控株ATCC 25922購(gòu)自國(guó)家臨床檢驗(yàn)中心。 1.1.2主要試劑：鏈霉素、慶大霉素、布霉素、卡那霉素、阿米卡星、奈替米星紙片均購(gòu)自杭州天和微生物試劑公司；M-H培養(yǎng)基、胰大豆蛋白胨肉湯購(gòu)自英國(guó)Oxiod公司；LB液體培養(yǎng)基購(gòu)自上海生工生物技術(shù)公司；Biospin細(xì)菌基因組DNA提取試劑盒購(gòu)自杭州博日科技有限公司；2×Taq PCR MasterMix試劑盒、電泳瓊脂糖購(gòu)自北京天根生化科技公司。 1.2方法 藥物敏感試驗(yàn)按NCCLS推薦的紙片擴(kuò)散法(Kerby-Bauer法)測(cè)定965株大腸埃希菌對(duì)氨基糖苷類藥物的耐藥率。 1.3 質(zhì)控菌株大場(chǎng)埃希菌ATCC25922由臨檢中心提供。 1.4細(xì)菌鑒定與藥敏測(cè)定按照《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第2版的要求接種羊血平板、麥康凱平板和SS平板，35℃孵育過(guò)夜，分離出單個(gè)菌落。血液及部分體液標(biāo)本用法國(guó)生物梅里埃公司BacT/Alert120血培養(yǎng)儀培養(yǎng)。用美國(guó)德靈MicroScan Walk2Away240全自動(dòng)微生物分析儀及陰性菌藥敏復(fù)合板同時(shí)進(jìn)行菌株鑒定與藥敏測(cè)定。藥敏檢測(cè)方法為微量稀釋法測(cè)定最低抑菌濃度(MIC)，結(jié)果判讀按照CLSI/NCCLS制定的標(biāo)準(zhǔn)[1]。 1.5 數(shù)據(jù)處理二、本表的統(tǒng)計(jì)數(shù)字來(lái)自微量肉湯稀釋法藥敏試驗(yàn)，根據(jù)CLSI的解釋標(biāo)準(zhǔn)來(lái)判斷抗生素敏感。