【摘要】 植物貝母屬百合科貝母具有清熱潤(rùn)肺，化痰止咳及散結(jié)等功效，是歷史悠久的傳統(tǒng)中藥。本文主要就貝母類(lèi)藥材的化學(xué)成分研究及質(zhì)量控制方面的進(jìn)展進(jìn)行綜述。

【關(guān)鍵詞】 貝母 化學(xué)成分 含量測(cè)定

植物貝母屬百合科，種類(lèi)繁多。藥用貝母多為百合科貝母屬植物的干燥鱗莖。2000版《中國(guó)藥典》收載的貝母有5種：川貝母（Bulbus fritillariae cirrhosae，主產(chǎn)于四川、青海、云南等地）、浙貝母(Bulbus fritillariae thunbergii，主產(chǎn)于浙江、江蘇、安徽等地 )、平貝母(Bulbus fritillariae ussuriensis，主產(chǎn)于黑龍江、遼寧、吉林等地)、伊貝母(Bulbus fritillariae pallidiflorae，主產(chǎn)于新疆)和湖北貝母(Bulbus fritillariae hupehensis，主產(chǎn)于湖北利川等地)。貝母具清熱潤(rùn)肺，化痰止咳及散結(jié)等功效，是具有悠久使用歷史的傳統(tǒng)中藥。 本文主要就貝母類(lèi)藥材的化學(xué)成分研究及質(zhì)量控制方面進(jìn)行綜述。

1 貝母的化學(xué)成分研究 貝母屬植物中的化學(xué)成分大致可分為兩大類(lèi)：生物堿類(lèi)和非生物堿類(lèi)。

1.1 生物堿類(lèi) 我國(guó)學(xué)者朱子清等從1932年開(kāi)始研究貝母堿的骨架結(jié)構(gòu)，經(jīng)過(guò)多年的努力工作，取得了巨大的進(jìn)展，溝通了貝母屬生物堿和藜蘆屬生物堿的關(guān)系，確定了貝母屬生物堿的骨架［1］。目前已發(fā)現(xiàn)的貝母生物堿絕大部分屬甾體生物堿，其中多為異甾衍生物，膽甾衍生物次之。異甾衍生物可以分為西藜蘆堿類(lèi)(Cevine group)和介藜蘆堿類(lèi)(Jervine group)；而膽甾衍生物又可分為白藜蘆堿類(lèi)(Verazine group)和茄次堿類(lèi)(Solanidinegroup)［2］。現(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，貝母中異甾體生物堿不僅具有顯著的止咳作用，而且有其它多方面的藥理活性。

1.1.1 浙貝母 目前已從浙貝母中分得貝母甲素(pemminine)、貝母乙素(peiminine) 、貝母辛(peimissine)、貝母乙素的兩個(gè)異構(gòu)體和貝母甲素、乙素的氮氧化物，以及有△5（6） 結(jié)構(gòu)的西藜蘆堿類(lèi)生物堿。這些生物堿的D/E 和E/F 環(huán)均為反式。另外， 還分離出茄堿類(lèi)生物堿。90年代又從浙貝母中分離出1種新生物堿浙貝寧(zhebinine)，經(jīng)鑒定為浙貝甲素27CH3的差向異構(gòu)體。還分離出了浙貝素( zhbeiresinol)。

1.1.2 川貝母 其主要成分為異甾類(lèi)生物堿和生物堿。川貝生物堿成分有川貝堿（Fritimine）、西貝素（Sipeimine），青貝中有青貝堿（Chinpeimine），白松貝中有松貝堿(Sonpeimine)，黃爐貝中有爐貝堿（Fritiminine），白爐貝中有白爐貝素，甘肅貝母中有岷貝堿（Minpeimine）；王化遠(yuǎn)等從四川家種貝母新種瓦布貝母(Bulbus Fritillaria Wabuensis S. Y. Tang et S. C.Yueh) 鱗莖中還分離出一種西貝素氮氧化物［3］，對(duì)化學(xué)結(jié)構(gòu)及構(gòu)型進(jìn)行了研究，確證該生物堿為自然界中極少見(jiàn)的西貝素β氮氧化(imperialineβNOxide)；陳茜等［4］從家種川貝瓦布貝母中分得一種新的化合物，命名為：異浙貝氮氧化物（isoverticineβNoxide）。

1.1.3 湖北貝母 湖北貝母，又稱(chēng)鄂貝、板貝、窯貝、奉貝，在湖北等地已有悠久的應(yīng)用歷史， 湖北貝母主要含甾體生物堿，已分離鑒定有：貝母素甲、貝母素乙、湖貝甲素(hupehenine)、、湖貝乙素(hupehenirine) 、湖貝嗪(hupehenizine)、湖貝新(hupehensine)、湖貝啶( hepehenidine)、湖貝苷( hupehemonoside) 及鄂貝新(ebeiensine)，其中含量較高者有貝母素甲、貝母素乙及湖貝甲素。

1.1.4 平貝母 野生平貝母主產(chǎn)于黑龍江、遼寧、吉林等省，但目前商品多為栽培品。與川貝母在化學(xué)成分及功效等方面幾乎相似。平貝母的主要有效成分類(lèi)型為甾體生物堿，主要有：西貝素(imperialine)、貝母辛、、貝母甲素平貝堿甲(pingoeimin A)、平貝堿乙(pingoeimin B)、平貝堿丙、平貝堿苷(petilinine glucoside)、平貝定苷(pijngbeidinoside)等。

1.1.5 伊犁貝母 伊犁貝母Fritillaria pallidiflora Schrenk產(chǎn)量高、生物堿的含量在同類(lèi)貝母中相對(duì)較高，抗病力強(qiáng)且藥材價(jià)格低廉，特別是其祛痰、鎮(zhèn)咳等生理活性較川貝母略強(qiáng)，近年來(lái)倍受人們的關(guān)注［5］。伊犁貝母的主要成分為異甾體生物堿和苷，尤以西貝素（Imperialine）和西貝素苷（imperialineeβDglucoside）為主要成分。

1.1.6 其他貝母 雜交貝母是以利川貝母Fritillaria lichuanensis P.Li et C. P. yang 為父本，湖北貝母F. hupehensis Hsiaoet K. C. Hsia 為母本雜交而成，阮漢利等［6］從雜交貝母生物堿部位中分離得到了7 種成分，鑒定為：湖貝乙素(hupehenirine，ZF1)、湖貝嗪(hupehenizine ，ZF2)、浙貝乙素(peiminine， verticinone，ZF3)、湖貝甲素(hupehenine ，ZF4) 、異浙貝甲素(isoverticinone，ZF5) 、浙貝甲素(peimine，verticine，ZF6) 、湖貝甲素苷(hupeheninoside，ZF7)。江西彭澤貝母Fritillaria monantha Migo，又稱(chēng)天目貝母，主產(chǎn)于江西省九江地區(qū)長(zhǎng)江流域的各縣。彭澤貝母作川貝母使用已有多年應(yīng)用歷史。彭澤貝母中有浙貝乙素、貝母辛、浙貝甲素、湖貝甲素［7］。

1.2 非生物堿成分 對(duì)貝母屬植物化學(xué)成分的研究主要集中在生物堿上，對(duì)非生物堿成分的研究始于1944 年。β2谷甾醇、硬脂酸、軟脂酸［8］、二萜的酯聚物及縮醛聚物等。 徐汝明等［9］的研究結(jié)果表明，平貝母中含有較高含量的腺苷及低含量的胸苷。實(shí)驗(yàn)表明腺苷為抑制血小板聚集的主要成分，提示核苷類(lèi)可能是貝母中除生物堿外的另一類(lèi)活性成分［10］。

2 質(zhì)量控制方法 生物堿等成分的含量常作為貝母類(lèi)藥物的指標(biāo)成分。其測(cè)定方法有比色法、兩相滴定法、非水滴定法、薄層色譜法、反相離子對(duì)高效液相色譜法等［11］。

2.1 HPLCELSD分析法 HPLCELSD是最常采用的方法。余華［12］等人以4種川貝母共有的有效成分貝母辛為指標(biāo)；采用Asilent Hypersil BDSC18(4.0mm×250mm，5μm)色譜柱，以乙腈水二乙胺(37:63:0.03)為流動(dòng)相，流速1.0ml·min-1；Alltech 2000蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)兩點(diǎn)法定量。結(jié)果表明貝母辛在0.03188-1.020 mg·ml-1呈線性，認(rèn)為該法為良好的貝母辛的定量分析方法，可用于川貝母藥材的質(zhì)量控制。曾令杰［13］等人建立了血漿中伊貝生物堿貝母辛、西貝素苷、伊貝堿苷A，西北素、新貝甲素的HPLC-ELSD分析法，采用NovaPak C18色譜柱(150×3.9 mm) ，Alltech 500蒸發(fā)光散射檢測(cè)器，流動(dòng)相為乙腈(A)一水(B)一二乙胺(C)(50:50:0.3)。流速0.8 ml／min；8～20 min，C不變，A的比例由50％線形遞增至90％ ，流速1 ml／min；結(jié)果血漿中各生物堿的濃度和其峰面積呈二次方程關(guān)系，各生物堿的分離度好，方法的準(zhǔn)確性和精密度均較高，適宜于藥代動(dòng)力學(xué)研究。

2.2 HPLCMS法 程顯隆［14］等人建立了平貝母中平貝堿甲、貝母素甲、貝母素乙3個(gè)單體生物堿成分以及總生物堿測(cè)定的HPLCMS法方法。色譜柱為Alltima C18色譜柱(250 mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相為乙腈0.03％二乙胺(30:70)，流速：1 ml·min-1；質(zhì)譜離子源為ESI；檢出模式為正離子檢測(cè)；電離電壓為3.2kV；電噴霧接口干燥氣(N2)流速為300 L·h-1，離子源溫度為105℃，錐孔電壓為30 V；脫溶劑溫度為150 ℃。選擇離子質(zhì)量數(shù)：464.7(平貝堿甲)、432.7(貝母素甲)、430.7(貝母素乙)、。測(cè)定平貝母中平貝堿甲、貝母素甲、貝母素乙的含量。另以三氯甲烷一甲醇(4:1)混合溶劑提取總生物堿，以溴麝香草酚藍(lán)比色法在pH 4.2，紫外吸收波長(zhǎng)413 nm下測(cè)定平貝母中總生物堿的含量。結(jié)果表明LCMs法測(cè)定平貝母中平貝堿甲、貝母素甲、貝母素乙的含量分別為5～19，1～3，2～3 μg·g-1；溴麝香草酚藍(lán)比色法測(cè)定總生物堿含量以貝母素乙計(jì)為600-1000μg·g-1結(jié)論：平貝母中單一生物堿成分含量太低，不宜作為平貝母藥材的質(zhì)量控制指標(biāo)，以溴麝香草酚藍(lán)比色法測(cè)定總生物堿含量可更客觀反映平貝母藥用物質(zhì)情況，更適用于平貝母藥材的質(zhì)量控制。

2.3 近紅外漫反射光譜法 胡鋼亮［15］等人應(yīng)用近紅外漫反射光譜技術(shù)和化學(xué)計(jì)量學(xué)方法，建立了一種快速檢測(cè)川貝母中浙貝母摻入量的新方法。以含不同川貝母和浙貝母比例的41個(gè)樣本建立校正集，采集其近紅外漫反射光譜數(shù)據(jù)，通過(guò)偏最小二乘法進(jìn)行回歸，經(jīng)內(nèi)部交叉驗(yàn)證，建立校正模型，進(jìn)而對(duì)預(yù)測(cè)集樣品進(jìn)行分析。對(duì)6個(gè)預(yù)測(cè)集樣本進(jìn)行預(yù)測(cè)分析，得到近紅外光譜預(yù)測(cè)值與真值的相關(guān)系數(shù)r=0.9977，樣品回收率為97.96％～100.9％，RSD為0.81％。結(jié)果顯示近紅外漫反射光譜法具有快速方便、結(jié)果準(zhǔn)確的特點(diǎn)，可以應(yīng)用于外觀相似，化學(xué)成分相近的中藥材的品質(zhì)分析和質(zhì)量控制。