中醫濕證代謝研究

來源:投稿網 時間:2022-12-05 10:00:04

代謝組學在中醫證候本質研究中的應用。

中醫證候是一種復雜的生活現象。近年來誕生的代謝組學不僅能反映生物的功能水平，還能精細測量代謝物。融入當前系統生物學的學術內涵將是中醫證候學的必然趨勢。隨著后基因組時代的到來，分子生物學作為現代生命科學的前沿學科，為中醫證候學的本質研究提供了新的研究思路和技術平臺。利用代謝組學的最新現代技術，探討中醫證候學的本質內涵，為微觀解讀中醫證候學的本質提供了可能性，為中醫證候學的現代研究開辟了新的研究領域。因此，我查閱了近10年的相關文獻，總結了以下代謝組學在中醫證候學本質研究中的應用概況。

2.1腎陽虛證。

董飛霞等[8]選擇60例慢性腎病患者（30例腎陽虛患者，30例非腎陽虛患者）和30名健康志愿者進行體檢，并采用尿液代謝組學指紋譜法進行研究。結果表明，慢性腎病三期與正常樣本代謝模式的差異非常明顯，建立的預測能力也非常強。25種不同代謝物排序后，標準產品識別差異物質的關鍵代謝成分是丙氨酸、胺丙二酸二乙酯等物質，明確改變方向和代謝方式，可以很好地區分腎陽虛證與非腎陽虛證的差異。楊麗萍等[9]利用代謝組學研究發現，腎陽虛模型動物的代謝網絡明顯偏離正常組動物，經溫陽中藥干預后，模型動物的代謝譜恢復到正常范圍，呈現網絡修復的結果。

2.2虛寒證。

徐斌等[10]觀察大鼠灌胃給龍膽水煎劑（RGD）后尿液代謝譜的變化及其與龍膽寒性作用的相關性。核磁共振氫譜（[1H]NMR）數據顯示，RGD組和對照組在主要成分分析得分圖中呈聚類分布，兩組之間沒有重疊。RGD組尿樣中葡萄糖和氨基酸顯著增加，牛磺酸和氮氧三甲胺顯著減少。長期給予大劑量RGD可使大鼠出現虛寒證體征。給藥后尿[1H]NMR譜的變化與龍膽寒性作用有關。

2.3寒證和熱證。

王江山等[11]采用基于超高效液相色譜-時間飛行質譜(UPLC-Q-TOF)的血漿代謝組學方法，分析類風濕性關節炎(RA)的疾病分類。因此，RA的不同病程(穩定期和活動期)和中醫特定證候(冷證和熱證)可以明顯區分。因此，代謝組學在闡明中醫理論、促進中醫與現代醫學交流方面具有廣泛的應用前景。2.4血熱證。

劉偉紅等[12]采用核磁共振譜技術，分析了53例銀屑病血熱證治療前后與31例健康志愿者血漿代謝產物譜的差異。結果表明，銀屑病血熱證患者可以明顯區分健康對照組，銀屑病血熱證治療前后也可以更好地區分。冷血解毒湯可調節銀屑病血熱證患者的糖脂代謝，使其代謝網絡呈現出修復正常狀態的趨勢。因此，代謝組學方法可以更全面地反映生物體的生理病理和代謝狀態，并可應用于功效評價研究。

2.5肝火亢盛證、痰濕雍盛證、陰虛陽亢證。

陸益紅等[13]探討了原發性高血壓辨證分型與基于GC/MS血清代謝組學的關系。GC/MS用于確定健康人和原發性高血壓患者的血清內源性代謝物。分析其代謝譜后，表明健康人與高血壓患者的血清代謝譜有明顯差異。上述三種類型的高血壓可以清晰區分，也可以顯示高血壓的發展過程。可以看出，基于GC/MS和模式識別的代謝組學技術在揭示中醫理論本質上具有廣泛的應用前景，是探索證候物基礎的更合適手段。

2.6肝郁脾虛證。

[14]4]討論慢性束縛應激老鼠（肝郁脾虛模型）血漿代謝表型的變化。通過對慢性束縛應激老鼠血漿1HNMR譜的分析，表明每組老鼠血漿1HNMR代謝譜之間存在差異，可以從代謝組分析中找到特定的標志性代謝物，解釋中醫肝郁脾虛證候的生物學本質，探討代謝組學在中醫證候學研究中的應用。因此，代謝組分析是一種具有良好發展前景的中醫證候學研究方法。

2.7痰瘀證。

劉偉紅等[15]探討了痰瘀證候的動態演變、時相特征和痰瘀代謝的變化。對高脂血癥模型鼠血漿1HNMR譜的分析顯示，每組鼠代謝譜不同。隨著模型時間的延長，不同時點模型組鼠的代謝譜也不同，表明高脂血癥早期以脂質代謝紊亂為特征。隨著病程的進展，參與血液凝固過程的乙酰糖蛋白表明凝血機制異常，酮體和乳酸的升高表明脂質代謝紊亂進一步加重。因此，可以從代謝組學分析中找出痰瘀演變過程的特殊標志性代謝物，以解釋中醫痰瘀證候的生物學本質。

2.8痰阻心脈證，氣陰兩虛證。

王廣基等[16]基于GC-TOF/MS代謝組學方法，全面檢測痰阻心脈和氣陰兩虛型冠心病患者血漿中小分子化合物，探索血漿內源性化合物的差異。結果表明，代謝組學方法可以區分這兩種冠心病和健康組。此外，這兩種類型之間多種內源性代謝物的含量明顯不同，與能量、氨基酸和核苷酸代謝異常有關。可以看出，代謝組學的整體數據和標志物信息顯示了痰阻心脈和氣陰兩虛型冠心病的差異，表明代謝組學研究的體內小分子化合物可能是中醫分型的物質基礎。

2.9氣虛血瘀證。

李林等[17]利用核磁共振氫譜法研究氣虛血瘀證老鼠對正常老鼠尿的組成變化，發現甲酸、肌氨酸酐、α-酮戊二酸、檸檬酸等成分含量發生了變化，為進一步提示氣虛血瘀證的生成機制和疾病治療提供了證據。此外，GC-MS研究了氣虛血瘀證小豬血漿樣本[18]，甘油、醋酸、肌醇、氨基酸、胸氨酸等脂質代謝物的代謝水平顯著提高，葡萄糖、氨基酸和脂質代謝物的含量顯著降低。可以看出，該代謝模式可用于臨床診斷和治療慢性心肌缺血，也可為中醫氣虛血瘀證的研究提供新的思路。

2.10濕證。

本課題組中醫濕證代謝研究，如慢性腎功能衰竭中醫濕證尿液代謝組學研究、慢性胃炎中醫濕證舌苔液代謝組學研究等，采用色譜-質譜聯用方法進行研究，得出相應的代謝產物UGO/MC基于各種代謝組學方法對醫學證候的本質研究，總結其優缺點如下。核磁共振譜(NMR)和色譜-質譜聯用是中醫證候本質研究的兩種常用方法。核磁共振譜法非常適合研究代謝物中的復雜成分。核磁共振氫譜([1H]NMR譜)是最常用的。NMR法非常實用，預處理生物樣品快捷簡單；它可以檢測整個動物或人體特定器官細胞中的代謝物組，而無損傷。但缺點是靈敏度低。色譜-聯用，如超高液相色譜-間飛行質譜(MCS)和QCS。定性和定量分析生物樣本中復雜代謝物中的各種成分，無偏差，高效快捷，靈敏度高。然而，每種色譜-質譜聯合技術都有其缺點。GC-MS預處理過程繁瑣，衍生方法復雜，GC分離效率低；LC-MS缺乏譜圖數據庫，難以識別化合物的結構；GC-TOF/MS的數據處理非常復雜，不易靈活使用。