【摘要】 目的對藏藥材打箭菊Pyrethrum tatsienense進行化學成分的分離純化和結構鑒定。方法利用正、反相硅膠柱色譜、聚酰胺柱色譜、制備薄層色譜和凝膠色譜等方法進行分離和純化，并經超導核磁共振、質譜等波譜技術鑒定其結構。結果從打箭菊花序的90%甲醇提取物中分離得到14個化合物，其結構分別鑒定為：胡蘿卜苷(1)、α-香樹脂醇(2)、β-香樹脂醇 (3)、β-谷甾醇 (4)、苜蓿素-4′-甲基醚 (5)、異鼠李素 (6)、苜蓿素(7)、柯伊利素 (8)、洋芹素 (9)、甲氧基壽菊素 (10)、木犀草素 (11)、槲皮素 (12)、木犀草素-7-O–β-D-葡萄糖苷 (13)和苜蓿素-4′-O-(β-愈創木基甘油基)-7-O-β-D-葡萄糖苷 (14 )。結論其中化合物2，3，6，8，10和12為首次從該植物中分離得到。

【關鍵詞】 打箭菊; 化學成分; 黃酮

打箭菊又名韃新菊或川西小黃菊，為菊科匹菊屬植物川西小黃菊Pyrethrum tatsienense (Bur.et Franch.) Ling的干燥頭狀花序[1]。打箭菊植物生長于海拔3 500～5 000 m的高山草地和灌叢中，分布于青海、四川、云南、西藏及甘肅等地，為常用藏藥“阿恰塞俊”的藥源植物之一，其味苦，性寒，具有治療頭痛、頭傷、跌打損傷、濕熱、瘡瘍、傷口流黃水、黃水瘡、肝炎等功效[2]。楊愛梅等[3～5]從青海采集的該藥材中分離鑒定出19個化合物，主要為黃酮和三萜類成分。本文對西藏產的打箭菊進行化學成分研究，從中分離鑒定出14個化合物：胡蘿卜苷 (1)、α-香樹脂醇 (2)、β-香樹脂醇 (3)、β-谷甾醇 (4)、苜蓿素-4′-甲基醚 (5)、異鼠李素 (6)、苜蓿素 (7)、柯伊利素 (8)、洋芹素 (9)、甲氧基壽菊素 (10)、木犀草素 (11)、槲皮素 (12)、木犀草素-7-O–β-D-葡萄糖苷 (13)和苜蓿素-4′-O-(β-愈創木基甘油基)-7-O-β-D-葡萄糖苷 (14)。其中化合物2，3，6，8，10和12為首次從該植物中分離得到。

1 儀器與材料

Bruker AV-600型核磁共振儀;Finnigan LCQDECA型質譜儀;Sephadex LH-20凝膠為Pharmacia公司產品;柱層析硅膠(160～200目)、薄層色譜硅膠GF254均為青島海洋化工廠產品。柱層析聚酰胺為中國醫藥(集團)上海化學試劑公司生產;D101大孔吸附樹脂為天津農藥股份有限公司產品;MCI 樹脂為Mitsubishi Chemical公司產品。打箭菊藥材采自西藏墨竹工卡，由西藏自治區食品藥品檢驗所格桑索朗副主任藥師采集和鑒定。

2 提取與分離

取打箭菊花序9.0 kg，用90%甲醇室溫浸提3次(每次7 d)，減壓濃縮后得到浸膏1200 g。將浸膏分散于水中，依次用石油醚、醋酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物220 g、醋酸乙酯萃取物140 g和正丁醇萃取物410 g。醋酸乙酯萃取物用MCI柱色譜除去色素，在80%甲醇洗脫物中析出大量白色固體1。醋酸乙酯萃取物除去色素后得125 g，通過硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，合并得到8個組分(A～H)。其中A組分析出晶體，重結晶得化合物2和3的混合物(10 mg)。C組分析出大量晶體，重結晶得化合物4。D組分析出固體5 (400 mg)。E組分析出物經過反復Sephadex LH-20凝膠柱色譜分離得到化合物6 (106 mg)、7 (1 g)和8 (10 mg)。F組分經過硅膠和凝膠柱層析得到化合物9 (87 mg)和10 (8 mg)。G組分經過聚酰胺柱層析得到化合物11 (9 g)。H組分經過反復硅膠柱層析得到化合物12 (20 mg)。正丁醇萃取物經過大孔吸附樹脂柱除去無機鹽和水溶性成分后得260 g樣品。通過硅膠柱色譜分離，氯仿-甲醇梯度洗脫，得化合物13 (7 g)和14 (900 mg)。

3 結構鑒定

化合物1：白色粉末(甲醇)，Liebermann-Burchard和Molish反應均為陽性，與胡蘿卜苷標準品混合點樣，3種溶劑系統(石油醚-丙酮、氯仿-丙酮和氯仿-甲醇)展開，其Rf值及顯色情況均與胡蘿卜苷標準品完全相同。化合物2：1H-NMR (600 MHz， CDCl3): δ 5.26(1H， m， H-12)， 3.20(1H， m， H-3)， 1.05(3H， s)， 1.01(3H， s)， 0.97(3H， s)， 0.93(3H， s )， 0.92(3H， s)， 0.90(3H，s)， 0.87(3H，s)， 0.79(3H， s);13CNMR (150 MHz， CDCl3): δ 38.8(C-1)， 27.1(C-2)， 79.0(C-3)， 38.9 (C-4)， 55.3(C-5)， 18.4(C-6)， 32.7(C-7)， 39.8(C-8)， 47.6(C-9)， 36.9(C-10)， 23.4(C-11)， 124.4(C-12)， 139.9(C-13)， 42.0(C-14)， 29.3(C-15)， 26.6(C-16)， 33.7(C-17)， 59.1(C-18)， 39.6(C-19)， 39.7(C-20)， 31.9(C-21)，41.1(C-22)， 28.1(C-23)， 15.4(C-24)， 15.5(C-25)， 16.3(C-26)， 23.3(C-27)， 28.0(C-28)， 17.7(C-29)， 21.4(C-30);這些波譜數據與α-香樹脂醇的文獻[6]報道數據一致。

化合物3：1HNMR (600 MHz， CDCl3): δ 5.24(1H， m， H-12)， 3.20(1H， m， H-3)， 1.07(3H， s)， 1.05(3H， s)， 0.99(3H，s)， 0.96(3H， s )， 0.94(3H， s)， 0.92(3H，s)， 0.84(3H，s)， 0.76(3H，s);13C-NMR (150 MHz， CDCl3): δ 38.8(C-1)， 27.0(C-2)， 79.0(C-3)， 38.9(C-4)， 55.3(C-5)， 18.3(C-6)， 32.9(C-7)， 39.4(C-8)， 47.7(C-9)， 37.1(C-10)， 27.6(C-11)， 121.7(C-12)， 145.2(C-13)， 41.7(C-14)， 28.1(C-15)， 26.2(C-16)， 32.5(C-17)， 41.5(C-18)， 46.8(C-19)， 31.1(C-20)， 34.7(C-21)， 37.1(C-22)， 28.1(C-23)， 15.5(C-24)， 15.6(C-25)， 16.2(C-26)， 25.9(C-27)， 28.4(C-28)， 23.4(C-29)， 23.7(C-30);這些波譜數據與β-香樹脂醇的文獻[7]報道數據一致。

化合物4：白色針狀結晶，與β-谷甾醇標準品混合點樣，3種溶劑系統(石油醚-丙酮、氯仿-丙酮和氯仿-甲醇)展開，其Rf值及顯色情況均與β-谷甾醇標準品完全相同。

化合物5：黃色粉末， ESI-MS m/z 343[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ 12.85(1H， s， 5-OH)， 10.82(1H， br.s， 7-OH)， 7.32(2H， s， H-2′，6′)， 7.05(1H， s， H-3) 6.57(1H， d， J=1.8 Hz， H-6)， 6.22(1H， d， J=1.8Hz， H-8)， 3.90(6H， s， 3′，5′-OCH3)， 3.76(3H， s， 4′-OCH3)。以上數據與苜蓿素-4′-甲基醚的文獻[3]報道數據一致。

化合物6：黃色粉末，ESI-MS: m/z 315[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ 12.45(1H， s， 5-OH)， 6.19(1H， d， J=2.0 Hz， H-6)， 6.47(1H， d， J=2.0 Hz， H-8)， 7.75(1H， d， J=2.0 Hz， H-2′)， 7.69(1H， dd， J=2.0， 6.4 Hz， H-6′)， 6.94(1H， d， J=6.4 Hz， H-5′)， 3.84(3H， s， OCH3)。以上數據與異鼠李素的文獻[8]報道數據一致。

化合物7：黃色針晶，ESI-MS: m/z 329[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ 12.95(1H， s， 5-OH)， 10.77(1H， br.s， 7-OH)， 9.29(1H， br.s， 4′-OH)， 6.20(1H， d， J=2.0Hz， H-6)， 6.55(1H， d， J=2.0 Hz， H-8)， 7.31(2H， s， H-2′，6′)， 6.96(1H， s， H-3)， 3.88(6H， s， OCH3)。以上數據與苜蓿素的文獻[9]報道數據一致。

化合物8：黃色粉末，ESI-MS: m/z 301[M+H]+ 299[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ 12.93(1H， s， 5-OH)， 7.52(1H， d， J=2.0 Hz， H-2′) 7.54(1H， dd， J=2.0， 8.9 Hz， H-6′)， 6.92(1H， d， J=8.9Hz， H-5′)， 6.17(1H， d， J=2.0 Hz， H-6)， 6.48(1H， d， J=2.0 Hz， H-8)， 6.85(1H， s， H-3)， 3.86(3H， s， -OCH3)。以上數據與柯伊利素的文獻[10]報道數據一致。

化合物9：黃色粉末，ESI-MS: m/z 269[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ 12.95(1H， s， 5-OH)， 10.78(1H， s， 7-OH)， 10.33(1H， s， 4′-OH)， 7.92(2H， d， J=8.6Hz， H-2′，6′)， 6.92(2H， d， J=8.6 Hz， H-3′，5′)， 6.18(1H， d， J=2.0 Hz， H-6)， 6.47(1H， d， J=2.0 Hz， H-8)， 6.76(1H， s， H-3)。以上數據與洋芹素的文獻[11]報道數據一致。

化合物10：黃色粉末，ESI-MS: m/z 345[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ12.43(1H， s， 5-OH)， 9.43(1H， s， 6-OH)， 9.25(1H， s， 8-OH)， 7.73(1H， d， J=2.2Hz， H-2′)， 7.58(1H， dd， J=2.2， 8.6Hz， H-6′)， 6.90(1H， d， J=8.6Hz， H-5′)， 6.82(1H， s， H-3)， 3.91(3H， s， OCH3)， 3.73(3H， s， OCH3); 13C-NMR(150 MHz， DMSO-d6): δ 176.5(C-4)， 158.9(C-7)， 152.0(C-2)， 151.5(C-5)， 148.3(C-9)，1 47.8(C-4′)， 145.5(C-3′)， 136.2(C-3)， 131.7(C-6)， 122.4(C-1′)， 20.5(C-6′)， 116.0(C-2′)， 115.7(C-5′)， 104.7(C-10)， 91.5(C-8)， 60.5(3-OCH3)， 56.8(6-OCH3)。以上數據與甲氧基壽菊素的文獻[12，13]報道數據一致。

化合物11：黃色粉末，ESI-MS: m/z 285[M-H]-; 與木犀草素標準品混合點樣， 3種溶劑系統(氯仿-丙酮、氯仿-甲醇和醋酸乙酯-甲醇)展開， 其Rf值及顯色情況均與標準品完全相同。

化合物12：黃色粉末，ESI-MS: m/z 301[M-H]-; 與槲皮素標準品混合點樣， 3種溶劑系統(氯仿-丙酮、氯仿-甲醇和醋酸乙酯-甲醇)展開， 其Rf值及顯色情況均與標準品完全相同。

化合物13：黃色粉末，ESI-MS: m/z 447[M-H]-; 1H-NMR(600 MHz， DMSO-d6): δ 12.97(1H， s， 5-OH)， 7.45(1H， dd， J=8.3， 2.2 Hz， H-6′)， 7.41(1H， d， J=2.2 Hz， H-2′)， 6.90(1H， d， J=8.3Hz， H-5′)， 6.78(1H， d， J=2.0 Hz， H-6)， 6.43(1H， d， J=8.3 Hz， H-8)， 6.73(1H， s， H-3)， 5.07(1H， d， J=7.5 Hz， H-1′′)， 3.1-3.7 (6H， m， glc-H)。以上數據與木犀草素-7-O-β-D-葡萄糖苷的文獻[3]報道數據一致。

化合物14：黃色粉末，ESI-MS: m/z 689 [M+H]+， 711 [M+Na]+， 687 [M-H]-， 493[M+H-C10H12O4]+， 492[M-H-C10H12O4]， 331[M+H-C10H12O4-glc]+;1H-NMR (600 MHz， DMSO-d6): δ 12.82(1H， s， 5-OH)， 7.32(2H， s， H-2′，6′)， 7.15(1H， s， H-3)， 6.96(1H， s， H-2″)， 6.92(1H， d，J=1.7Hz， H-8)， 6.78(1H， d， J=8.0Hz， H-6″)， 6.68(1H， d， J=8.0Hz， H-5″)， 6.46(1H， s， H-6)， 5.04(1H， d， J=7.2Hz， H-1″′)， 4.83(1H， m， H-7″)， 4.27(1H， m， H-8″)， 3.86(6H， s， 3′，5′-OCH3)， 3.85(3H， s， 3″-OCH3)， 3.73(2H， m， 9″-CH2)， 3.72(2H， m， 6′″-CH2)， 3.65-3.35(4H， br m， H-2″′，3″′，4″′，5″′); 13C-NMR (150 MHz， DMSO-d6): δ 182.6(C-4)， 164.0(C-2)， 163.6(C-7)， 161.6(C-5)， 157.4(C-9)， 153.4(C-3′)， 148.7(C-5′)， 147.4(C-3″)， 145.9(C-4″)， 140.6(C-4′)， 133.5(C-1″)， 125.6(C-1′)， 119.7(C-6″)， 115.2(C-5″)， 111.5(C-2″)， 106.0(C-3)， 105.5(C-2′，6′)， 104.9(C-10)， 100.6(C-1″′)， 100.1(C-6)， 95.9(C-8)， 87.4(C-8″)， 77.9(C-5″′)， 77.1(C-3″′)， 73.6(C-2″′)， 72.1(C-7″)， 70.1(C-4″′)， 61.3(C-6″′)， 60.9(C-9″)， 56.9(3′，5′-OCH3)， 56.0(3′′-OCH3)。以上波譜數據與苜蓿素-4′-O-β-愈創木基甘油基-7-O-β-D-葡萄糖苷的文獻[14]報道數據一致。