【關鍵詞】 188，Re

關鍵詞:188 Re;藥代動力學;裸小鼠;單克隆抗體;肝癌

摘 要:目的 研究188 Re標記的肝癌單抗片段HAb18F（ab’）2 在荷肝癌裸鼠體內的藥代動力學，求取藥代動力學參數，建立藥代動力學模型. 方法 5組裸鼠經尾靜脈注入1.85MBq188 Re-HAb18F（ab’）2 ，在不同時間點處死裸鼠，測量血及各臟器放射性計數.用3P97藥代動力學軟件處理188 Re-HAb18F（ab’）2 給藥后荷瘤鼠各時間點的血液放射性濃度及各主要臟器的放射性濃度，計算藥代參數. 結果 188 Re-HAb18F（ab’）2 在裸鼠體內藥代動力學參數分別為T1/2 2.29h，Vd1.49L，AUC20.49×109 Bq?h?L-1 ，CL0.45×10-3 L?h-1 .

188 Re-HAb18F（ab’）2 特異性聚集于腫瘤中，在瘤體中以較高水平維持較長時間，在正常組織中代謝較快，主要從腎臟中排泄. 結論 188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷肝癌裸鼠體內藥代動力學符合線性一室模型.

Keywords:188 Re;pharmacokinetics;nude mice;monoclonal antibody;hepatoma

Abstract:AIM To establish the pharmacokinetic model of188 Re-HAb18F（ab’）2 and to evaluate its pharmacokinetic pa┐rameters.METHODS The mice was sacrificed at different time after188 Re-HAb18F（ab’）2 i.v.injected into hepatoma-bearing nude mice.The blood and organs’radioactivity were measured.The concentrations of188 Re-HAb18F（ab’）2 were evaluated with a pharmacokinetic3P97software.RESULTSParameters of188 Re-HAb18F（ab’）2 were T1/2 2.29h，Vd1.49L，AUC20.49×109 Bq?h?L-1 ，CL0.45×10-3 L?h-1 .188 Re-HAb18F（ab’）2 was located specially in hepatoma with high selective reactivity of HAb18F（ab’）2 .188 Re-HAb18F（ab’）2 was mainly eliminated by kidney.CONCLU┐SION Pharmacokinetics of188 Re-HAb18F（ab’）2 conforms to a l-compartment model.

0 引言

188 Re是一種新型放射性核素，其良好的核物理性質使其有望成為一種新的治療性核素.現對188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷瘤鼠體內的藥代動力學進行研究［1］ ，證明其是否選擇性在瘤體內聚集，建立藥代動力學模型，獲取藥代動力學參數，為188 Re-HAb18F（ab’）2 臨床治療提供依據.

1 材料和方法

1.1 腫瘤動物模型 選5周齡BALB/c裸鼠（由本校實驗動物中心提供），于其右下肢根部sc人HCC（hepatocellular carcinoma，肝細胞肝癌，由中科院上海細胞所細胞庫提供）細胞1×107 （0.2mL），腫瘤長至直徑1cm左右時待用.

1.2 McAb及放射性核素標記 HAb18為鼠源性抗人肝細胞瘤McAb，IgG1 亞型.HAb18IgG用胃蛋白酶消化法消化，經Phenyl-sepharoseHP柱（Amersham pharmacia）純化，即得純度大于95%的F（ab’）2 ，SDS-PAGE鑒定其相對分子質量約為11×104 .采取188 Re直接法標記F（ab’）2［2］ ，即F（ab’）2 經2-硫基乙醇還原后，加入含有穩定劑葡庚糖酸鈉的亞錫和188 ReO4- ，37℃反應2～3h.紙層析法測定標記率>90%.

1.3 荷瘤鼠體內分布研究 荷瘤裸鼠15只，隨機分為5組，每組3只，每只鼠尾靜脈給188 Re-HAb18F（ab’）2 1.85MBq，分別于1，4，18，24和48h各處死1組，取血及各主要臟器，稱重，用γ-放射免疫計數儀（國營262廠醫用核儀器分廠）測定單位重量各臟器中每分鐘閃爍數值（cpm），求取腫瘤與非腫瘤臟器單位重量的cpm比值（T/NT）及每克臟器中攝入放射性占給藥量的百分比（%ID?g-1 ）.

1.4 藥代動力學研究 用3P97藥代動力學軟件計算血及各臟器藥物濃度值，求取藥代動力學參數，建立藥代動力學模型.

2 實驗結果

Tab1示各時間點藥物濃度值，表明其生物學分布.血藥濃度經3P97軟件計算，顯示其符合線性一室模型，在初值擬合曲線也反映一室模型的擬合效果滿意，Fig1為藥代動力學曲線.血藥動力學參數見Tab2.各組織半衰期（h）是:腫瘤（32.99），血（2.29），肺（5.67），骨（11.76），肌肉（9.22），小腸（7.47），大腸（15.08），胃（11.49），心臟（2.29），肝（5.67），脾（19.76），腎（11.53）.

3 討論

188 Re發射2110kevβ射線，155kevγ射線，半衰期17h，具有良好的核物理性能，有望成為新的治療性核素.188 Re從188 W-188 Re發生器得到，來源方便，具有很高的放射性比活度，利于單抗標記.動物實驗證實，

188 Re標記的肝癌單抗片段HAb18F（ab’）2 具有明顯的抑癌效應.而有關188 Re-HAb18F（ab’）2 在動物體內的藥代動力學研究未見全面報道［3，4］ .

從Tab1中可見，188 Re-HAb18F（ab’）2 在腫瘤中放射性以較高水平維持較長，在18h仍維持較高水平.從T/NT值中可看出，除腎臟外，其余T/NT值均較高，說明其特異性地集中于腫瘤細胞，在其他臟器中代謝較快，有利于減少其對正常組織的損傷.瘤/血比值在48h達到最高，瘤/肝比值在18h達到最高.從Tab1中還可見，腫瘤在給藥后1，4和24h的放射性分別占3.83%，6.48%和9.47%，肝臟的放射性分別占1.64%，2.59%和3.19%，腎臟放射性分別占76.2%，78.8%和76.3%，這提示抗體片段及其代謝物主要經過腎臟排泄，胃、肌肉、肺、脾等分布較少［5-8］ . 188 Re-HAb18F（ab’）2 在腫瘤組織的半衰期達32.99h，均比其他組織的半衰期長，說明188 Re-HAb18F（ab’）2 選擇性地在腫瘤部位濃聚，且衰減速度慢.這也說明單克隆抗體對腫瘤組織的特異性結合，而對正常組織的毒副作用小.

血藥濃度經3P97軟件計算及從Fig1中可見，188 Re-HAb18F（ab’）2 在血中代謝為線性一室模型，說明188 Re-HAb18F（ab’）2 瞬間分布至全身，且藥物濃度保持動態平衡，藥物恒比規律從消除器官中消 除，血液中藥物濃度與消除速度成正比，藥物的血漿半衰期不變.藥物濃度越高，消除速度越快，藥物濃度越低，消除速度越小［9-12］ .

表1 188 Re-HAb18F（ab’）2 在1，4，18，24和48h在荷肝癌裸鼠體內分布略

表2 188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷瘤鼠體內藥代動力學參數略

圖1 略

188 Re-HAb18F（ab’）2 在血液中的半衰期為2.99h，而在腫瘤中的半衰期為32.99h，放射性在腫瘤組織中減少之前，已從血中代謝一部分，使全身血液循環血中放射性減少.同時188 Re-HAb18F（ab’）2 血液半衰期為2.29h也遠小于188 Re物理半衰期17h，這樣188 Re-HAb18F（ab’）2 可在體內經血液迅速消除，具有良好的臨床應用價值［13-15］ .

［1］ Jvweid M，Sharkey RM，Swayne LC.Pharmacokinetics，dosimetry and toxicity of rhenium-188-labeled anti-carcinoem-bryonic antigen monocloned antibody.MN-14，in gastroin-testinal cancer ［J］.J Nucl Med，1998;39:34-42.

［2］Bian HJ，Chen ZN，Lou C，Mi L，Wang J，Yue XL.188 Re-la- beled HAb18F（ab’）2 of hepatoma radioimmunoimaging ［J］.Zhongliu（Tumor），2000;20（3）:181-183.

［3］Iznaga-Escobar N.188 Re-direct labeling of monoclonal antibody for radioimmunotherapy of solid tumors:Biodistrobution，nor-mal organ dosimetry，and toxicology ［J］.Nucl Med Biol，1998;25:441-447.

［4］Oliva J，Pimentel G，Peralta R.Radioimmunoscintigraphy of colorectal cancer using the anti CEA monoclonal antibody BW431/26.Final results ［J］.Rev Esp Med Nucl，1999;18:5-15.

［5］Lan Q，Huang Q，Zhuang DL，Wu YF，Sun ZF.Study on the pharmacokinetics of immunoradiotherapeutic agent S-MAb SZ39in glioma-bearing nude mice ［J］.Zhongguo Yaoxue Zazhi（Chin Pharm J），1999;34（10）:683-686.

［6］Ge ZH，Li H，Liu CH，Ruan JX.Pharmacokinetics of tricyclop-inate hydrochloride in mice ［J］.Zhongguo Yaolixue Tongbao（Chin Pharmacological Bulletin），1998;14（4）:322-325.

［7］Fritzberg AR.Antibody pretargeted radiotherapy:A new ap-proach and a second chance ［J］.J Nucl Med，1998;39:20N-36N.

［8］Duan XD，Chen ZN，Bian HJ，Wen AD，Feng Q.Pharma-cokinetics of technetium-99m labeled anti-hepatoma monoclonal antibody HAb18and it’s F（ab’）2 fragment in mice ［J］.Zhong-guo Yaoxue Zazhi（Chin Pharm J），2000;35（7）:465-467.

［9］Dickman S.Antibodies stage a comeback in cancer treatment ［J］.Science，1998;280:1196-1197.

［10］DeNardo SJ，Kukis DL，Miers LA.Yttrium-90-DOTA-peptide-chimeric L6radioimmunoconjugate:Efficacy and toxicity in mice bearing p53mutant human breast cancer xenograft ［J］.J Nucl Med，1998;39:842-849.

［11］Kairemo KJ，Strberg S，Nikula TK.Expressioin profile of vas-clular cell adhesion molecule-1（CD106）in inflammatory foci us-ing rhenium-188labeled monoclonal antibody in mice ［J］.Cell Adhes Commum，1998;54:325-333.

［12］Schmidt PF，Smith SV，Bundesen PG.188 Re DD-3B6/22Fab’for use in therapy of ovarian cancer:Labeling and animal studies ［J］.Nucl Med Biol，1998;25:639-649.

［13］Hosono MN，Hosono M，Zamora PO.Localization of colorectal carcinoma by rhenium-188-labeled B72.3antibody in xenograft mice ［J］.Ann Nucl Med，1998;12:83-88.

［14］Kramer A，Alberto R，Egli A.Derivatives of1，3，5-triamino-1，3，5-trideox-ycis-inositol as versatile pentadentate ligands for protein labeling with Re-186/188，prelabeling，biodistribution，and X-ray structural studies ［J］.Bioconjug Chem，1998;9:691-702.

［15］Anderson CJ，Jones LA，Baas LA.Radiotherapy，toxicity and dosimetry of copper-64-TETA-octreotide in tumor-bearing rats ［J］.J Nucl Med，1998;39:1944-1951.