【關(guān)鍵詞】 188，Re

關(guān)鍵詞:188 Re;藥代動(dòng)力學(xué);裸小鼠;單克隆抗體;肝癌

摘 要:目的 研究188 Re標(biāo)記的肝癌單抗片段HAb18F（ab’）2 在荷肝癌裸鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)，求取藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，建立藥代動(dòng)力學(xué)模型. 方法 5組裸鼠經(jīng)尾靜脈注入1.85MBq188 Re-HAb18F（ab’）2 ，在不同時(shí)間點(diǎn)處死裸鼠，測(cè)量血及各臟器放射性計(jì)數(shù).用3P97藥代動(dòng)力學(xué)軟件處理188 Re-HAb18F（ab’）2 給藥后荷瘤鼠各時(shí)間點(diǎn)的血液放射性濃度及各主要臟器的放射性濃度，計(jì)算藥代參數(shù). 結(jié)果 188 Re-HAb18F（ab’）2 在裸鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)分別為T(mén)1/2 2.29h，Vd1.49L，AUC20.49×109 Bq?h?L-1 ，CL0.45×10-3 L?h-1 .

188 Re-HAb18F（ab’）2 特異性聚集于腫瘤中，在瘤體中以較高水平維持較長(zhǎng)時(shí)間，在正常組織中代謝較快，主要從腎臟中排泄. 結(jié)論 188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷肝癌裸鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)符合線(xiàn)性一室模型.

Keywords:188 Re;pharmacokinetics;nude mice;monoclonal antibody;hepatoma

Abstract:AIM To establish the pharmacokinetic model of188 Re-HAb18F（ab’）2 and to evaluate its pharmacokinetic pa┐rameters.METHODS The mice was sacrificed at different time after188 Re-HAb18F（ab’）2 i.v.injected into hepatoma-bearing nude mice.The blood and organs’radioactivity were measured.The concentrations of188 Re-HAb18F（ab’）2 were evaluated with a pharmacokinetic3P97software.RESULTSParameters of188 Re-HAb18F（ab’）2 were T1/2 2.29h，Vd1.49L，AUC20.49×109 Bq?h?L-1 ，CL0.45×10-3 L?h-1 .188 Re-HAb18F（ab’）2 was located specially in hepatoma with high selective reactivity of HAb18F（ab’）2 .188 Re-HAb18F（ab’）2 was mainly eliminated by kidney.CONCLU┐SION Pharmacokinetics of188 Re-HAb18F（ab’）2 conforms to a l-compartment model.

0 引言

188 Re是一種新型放射性核素，其良好的核物理性質(zhì)使其有望成為一種新的治療性核素.現(xiàn)對(duì)188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷瘤鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)進(jìn)行研究［1］ ，證明其是否選擇性在瘤體內(nèi)聚集，建立藥代動(dòng)力學(xué)模型，獲取藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，為188 Re-HAb18F（ab’）2 臨床治療提供依據(jù).

1 材料和方法

1.1 腫瘤動(dòng)物模型 選5周齡BALB/c裸鼠（由本校實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供），于其右下肢根部sc人HCC（hepatocellular carcinoma，肝細(xì)胞肝癌，由中科院上海細(xì)胞所細(xì)胞庫(kù)提供）細(xì)胞1×107 （0.2mL），腫瘤長(zhǎng)至直徑1cm左右時(shí)待用.

1.2 McAb及放射性核素標(biāo)記 HAb18為鼠源性抗人肝細(xì)胞瘤McAb，IgG1 亞型.HAb18IgG用胃蛋白酶消化法消化，經(jīng)Phenyl-sepharoseHP柱（Amersham pharmacia）純化，即得純度大于95%的F（ab’）2 ，SDS-PAGE鑒定其相對(duì)分子質(zhì)量約為11×104 .采取188 Re直接法標(biāo)記F（ab’）2［2］ ，即F（ab’）2 經(jīng)2-硫基乙醇還原后，加入含有穩(wěn)定劑葡庚糖酸鈉的亞錫和188 ReO4- ，37℃反應(yīng)2～3h.紙層析法測(cè)定標(biāo)記率>90%.

1.3 荷瘤鼠體內(nèi)分布研究 荷瘤裸鼠15只，隨機(jī)分為5組，每組3只，每只鼠尾靜脈給188 Re-HAb18F（ab’）2 1.85MBq，分別于1，4，18，24和48h各處死1組，取血及各主要臟器，稱(chēng)重，用γ-放射免疫計(jì)數(shù)儀（國(guó)營(yíng)262廠醫(yī)用核儀器分廠）測(cè)定單位重量各臟器中每分鐘閃爍數(shù)值（cpm），求取腫瘤與非腫瘤臟器單位重量的cpm比值（T/NT）及每克臟器中攝入放射性占給藥量的百分比（%ID?g-1 ）.

1.4 藥代動(dòng)力學(xué)研究 用3P97藥代動(dòng)力學(xué)軟件計(jì)算血及各臟器藥物濃度值，求取藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)，建立藥代動(dòng)力學(xué)模型.

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

Tab1示各時(shí)間點(diǎn)藥物濃度值，表明其生物學(xué)分布.血藥濃度經(jīng)3P97軟件計(jì)算，顯示其符合線(xiàn)性一室模型，在初值擬合曲線(xiàn)也反映一室模型的擬合效果滿(mǎn)意，F(xiàn)ig1為藥代動(dòng)力學(xué)曲線(xiàn).血藥動(dòng)力學(xué)參數(shù)見(jiàn)Tab2.各組織半衰期（h）是:腫瘤（32.99），血（2.29），肺（5.67），骨（11.76），肌肉（9.22），小腸（7.47），大腸（15.08），胃（11.49），心臟（2.29），肝（5.67），脾（19.76），腎（11.53）.

3 討論

188 Re發(fā)射2110kevβ射線(xiàn)，155kevγ射線(xiàn)，半衰期17h，具有良好的核物理性能，有望成為新的治療性核素.188 Re從188 W-188 Re發(fā)生器得到，來(lái)源方便，具有很高的放射性比活度，利于單抗標(biāo)記.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)，

188 Re標(biāo)記的肝癌單抗片段HAb18F（ab’）2 具有明顯的抑癌效應(yīng).而有關(guān)188 Re-HAb18F（ab’）2 在動(dòng)物體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究未見(jiàn)全面報(bào)道［3，4］ .

從Tab1中可見(jiàn)，188 Re-HAb18F（ab’）2 在腫瘤中放射性以較高水平維持較長(zhǎng)，在18h仍維持較高水平.從T/NT值中可看出，除腎臟外，其余T/NT值均較高，說(shuō)明其特異性地集中于腫瘤細(xì)胞，在其他臟器中代謝較快，有利于減少其對(duì)正常組織的損傷.瘤/血比值在48h達(dá)到最高，瘤/肝比值在18h達(dá)到最高.從Tab1中還可見(jiàn)，腫瘤在給藥后1，4和24h的放射性分別占3.83%，6.48%和9.47%，肝臟的放射性分別占1.64%，2.59%和3.19%，腎臟放射性分別占76.2%，78.8%和76.3%，這提示抗體片段及其代謝物主要經(jīng)過(guò)腎臟排泄，胃、肌肉、肺、脾等分布較少［5-8］ . 188 Re-HAb18F（ab’）2 在腫瘤組織的半衰期達(dá)32.99h，均比其他組織的半衰期長(zhǎng)，說(shuō)明188 Re-HAb18F（ab’）2 選擇性地在腫瘤部位濃聚，且衰減速度慢.這也說(shuō)明單克隆抗體對(duì)腫瘤組織的特異性結(jié)合，而對(duì)正常組織的毒副作用小.

血藥濃度經(jīng)3P97軟件計(jì)算及從Fig1中可見(jiàn)，188 Re-HAb18F（ab’）2 在血中代謝為線(xiàn)性一室模型，說(shuō)明188 Re-HAb18F（ab’）2 瞬間分布至全身，且藥物濃度保持動(dòng)態(tài)平衡，藥物恒比規(guī)律從消除器官中消 除，血液中藥物濃度與消除速度成正比，藥物的血漿半衰期不變.藥物濃度越高，消除速度越快，藥物濃度越低，消除速度越小［9-12］ .

表1 188 Re-HAb18F（ab’）2 在1，4，18，24和48h在荷肝癌裸鼠體內(nèi)分布略

表2 188 Re-HAb18F（ab’）2 在荷瘤鼠體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)參數(shù)略

圖1 略

188 Re-HAb18F（ab’）2 在血液中的半衰期為2.99h，而在腫瘤中的半衰期為32.99h，放射性在腫瘤組織中減少之前，已從血中代謝一部分，使全身血液循環(huán)血中放射性減少.同時(shí)188 Re-HAb18F（ab’）2 血液半衰期為2.29h也遠(yuǎn)小于188 Re物理半衰期17h，這樣188 Re-HAb18F（ab’）2 可在體內(nèi)經(jīng)血液迅速消除，具有良好的臨床應(yīng)用價(jià)值［13-15］ .

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