葛根素的藥代動力學研究概況

佚名

作者：郭瑩，萬海同，張莉，余勤，樊守艷

【關鍵詞】葛根；，，葛根素；，，藥代動力學

摘要：從樣品預處理、檢測方法、葛根素在體內的吸收、分布、代謝排泄及藥動學參數等幾個方面著手，較為系統地綜述了近10余年葛根素藥動學研究概況，可為有關葛根素藥動學的研究提供參考。

關鍵詞：葛根；葛根素；藥代動力學

藥代動力學在中藥研究領域受到越來越多學者的關注，葛根素作為葛根主要有效成分之一，其藥代動力學研究也日益深入，現就近年來的研究概況綜述如下。

1 樣品處理

對藥代動力學樣品的處理主要是去除其中的蛋白，多加入有機溶劑，如無水甲醇或乙醇［1］，血漿與醇的比例多為1∶4［2，3］。對于組織樣品［4］，則按1:4（G/V）加入生理鹽水，勻漿后按1∶13.5（G/V）加入無水甲醇。張志榮等［5］認為用無水乙醇沉淀蛋白，需要用量較大才能使蛋白沉淀完全，建議在血漿中加入等量0.58 mol/L高氯酸沉淀蛋白質［6~8］。

另外，還有加入等量蛋白沉淀劑［9］、水浴法［10，11］、固相萃取法（SPE）［12］等預處理樣品的報道。

2 檢測方法

2.1 高效液相色譜法

2.1.1 內標法金昔陸等［13］給狗靜注葛根素(2.25 mg?kg1)后，采用大豆苷元為內標，用反相高效液相色譜熒光檢測法分離測定血漿中的微量葛根素。并認為在流動相中加入pH7.4磷酸緩沖液，可提高熒光檢測的靈敏度和穩定性。而用pH4.0的磷酸緩沖液，則熒光檢測靈敏度大大低于紫外檢測［14］。在葛根素乙醇溶液中加入稀氨水可使熒光強度增強11.6倍，熒光法比紫外法靈敏度高60倍［15］。

黃熙等［16］認為因葛根中即含有大豆苷元，故不適于葛根中葛根素的測定；選用對羥基苯甲酸較好，最大吸收在254 nm，在248nm處有較高的靈敏度，且分離完全。

2.1.2 外標法用外標法測定血或組織中的葛根素，流動相多用甲醇水（或酸水）系統，甲醇比例多為25%左右［3，17，18］，或采用甲醇水磷酸緩沖液系統［19，20］，但以甲醇水為流動相可避免使用緩沖液對柱子的影響［7］。

2.2 其它方法朱秀媛等曾建立薄層色譜紫外分光光度法和薄層色譜熒光分光光度法分離測定大鼠體內葛根素，并認為上述方法操作繁瑣，用血量較多，其靈敏度不能用于研究低劑量下大動物和人的藥代動力學［21，22］。高效毛細管電泳(HPCE)法有著理論柱效高，所需樣品少等優點［23］，田景振等［1］用該法對葛根素進行了測定，并認為磷酸緩沖液（pH=7.4）測定葛根素，存在響應值較小和基線不穩定的缺點，用硼酸緩沖液較理想。

3 藥代動力學研究

3.1 藥物在體內的吸收小鼠口服PF（葛根黃酮）（空腹12 h）不同劑量（2.4，0.2 g/kg）后，體內血藥葛根素在15~30 min達高峰，2 h后開始下降。血藥濃度隨給藥劑量增加而增高。小鼠不禁食情況下口服葛根黃酮，則血藥葛根素的達峰時間后移，約在0.5~1 h出現［18］。

磷脂的乳化作用可提高葛根素在離體腸管吸收量的2~4倍，可能是乳劑憑其脂溶性而易于通過生物膜，從而提高葛根素生物利用度［24］。磷脂可明顯增強葛根素改善家兔血液流變和微循環的作用，除了與提高葛根素的生物利用度有關外，還可能與磷脂有利于葛根素通過生物膜進入靶器官內有關［25，26］。

3.2 藥物在體內的分布在大鼠、兔、狗、人的實驗中表明［21］，葛根素在體內分布快且較廣。靜注后，藥物在各組織中的分布以腎、血漿、肝中較高；睪丸、心臟、肌肉和脾臟次之。葛根素可通過血腦屏障進入腦內，但含量較低。蛋白結合實驗表明，葛根素同肝、腎、血漿、肺組織蛋白結合率分別為（32.5±4.4）%、（27.1±3.1）%、（24.6±3.5）%及15.8%。

有實驗表明［8］葛根素通過腹腔注射能透過血房水屏障，進入房水，為葛根素全身用藥治療眼部疾病提供了實驗依據。

給小鼠口服新工藝制備的葛根黃酮后30 min，心、腦、肝、腎中均有分布，且藥物濃度由高到低依次為腎>肝>腦>心，在大鼠體內為腎>脾>心>肝>肺>腦，其在腦中的分布雖然較低，但其代謝較緩慢［18］。

生理狀態下，靜脈注射CBN（金森腦泰注射劑）15 min后，葛根素在腎和肝中的濃度均達到最高，分別占總給藥量的31.7%和0.3%，并隨時間延長而很快下降。1h后腎內的藥量占總藥量的3%，30 min時肝中的藥物濃度僅為給藥量的0.09%，說明葛根素主要在腎臟中分布［4］。

3.3 藥物的代謝與排泄小鼠口服葛根素制劑，其主要排泄途徑為腸道［18］；給藥后24 h自糞便中排出劑量的35.7%，由尿中只排出劑量的1.85%［27］。

人及大鼠靜脈注射葛根素制劑，其主要由腎臟清除［6］［28］。大鼠靜脈注射CBN（金森腦泰注射劑）后12 h，藥物自尿排除給藥量的34.6%，其中85.6%在前2 h從尿中排出，12 h后尿中幾無法測出。糞便和膽汁的排泄量均很少［28］。

3.4 藥代動力學參數小鼠、大鼠［18］，兔［29］口服葛根素制劑后，葛根素在體內的藥-時過程為二室模型。小鼠［18］、狗［13］、糖尿病患者［17］靜脈滴注葛根素制劑，葛根素滴眼液給家兔一次滴眼后［19，20］，其在體內的藥時過程為線性動力學過程，符合開放式二室模型。

但是，炎彬等［30］在對葛根黃酮及其葛根素在正常和腦缺血再灌注大鼠體內藥動學比較中，葛根素的藥時曲線經擬合后為一室模型，跟文獻報道相出入的原因可能是測試條件、樣品處理方法及單一成分和復方的區別等造成的。

4 影響因素

4.1 實驗動物葛根素在大鼠、兔、犬3種動物體內的藥代動力學參數與其體重具有相關性：表觀分布容積、穩態分布容積、分布半衰期、體內平均滯留時間、清除率均隨體重增加而異速增大，相關性顯著。相反，所有速率常數包括K12、K21、和K10隨體重增加而異速減少［31］。

4.2 生理、病理狀態小鼠空腹12 h口服PF（葛根黃酮）后，體內血藥濃度在15~30 min達高峰，不禁食情況下達峰時間后移［18］。

腦缺血再灌注狀態下大鼠體內的葛根素藥時曲線下面積增加，平均駐留時間延長，表觀分布容積減小，并且房室模型由一室變為二室。說明在腦缺血再灌注造成的病理損傷下，葛根素從血漿中向其它組織的灌注速率減慢，從體內的消除時間延長［2］［32，33］。可能是在病理狀態下，機體膜轉運能力低下所致［30］。與生理狀態下大鼠相比，腦缺血再灌注大鼠肝臟中葛根素濃度明顯升高，為正常鼠的2倍強，腎臟達峰時間明顯延遲為30 min［4］。

靜脈滴注葛根素后［17］，糖尿病腎病中期組（DN2）較健康志愿者組（NC）和臨床早期組（DN1）藥物t1/2β延長，清除率（Cl）下降，5 min及5 h的藥物濃度下降延緩。NC組與DN1組比較無顯著差異，表觀分布容積（Vd）DN各組較NC組減少，腎臟的損害程度可嚴重影響藥物的分布與排泄，建議DN進入臨床中期，給藥劑量宜偏小［6］。

4.3 中藥成分和復方單一化學成分的藥動學與復方中該化學成分的藥動學存在差異，復方中各個成分之間相互作用影響藥動學過程［30］。

盧弘等［33］對金森腦泰注射劑中葛根素在正常和缺血再灌注模型大鼠體內的藥動學研究中，發現3個未知成分的色譜峰中有兩個與葛根素的紫外光譜相似，且峰面積的經時消長過程與葛根素相似，利用未知成分峰面積消長變化，求得藥動學參數，有助于更全面地反映中藥復方（有效部位）的藥物代謝規律，提示葛根素的藥動學參數可以基本反映葛根黃酮的藥動學參數［30］。

4.4 不同的給藥方式和劑量一般口服后5~15 min體內即可檢出，0.5~1 h達高峰，以后進入消除相。大鼠有效劑量（0.2 g/kg）的消除相半衰期（t1/2）為1.305 h，吸收相t1/2為0.17 h。給大鼠靜注葛根素，消除半衰期（t1/2）為(20±8) min，吸收相為(2.4±9) min，表明口服葛根黃酮在吸收和消除時間上均較靜注葛根素延長［34］。體內吸收AUC 0~8 h與給藥劑量呈正相關，但其排泄速率并不隨著服藥量增加而明顯加快［18］。

不同的給藥方式可影響葛根素的排泄途徑，如口服給藥葛根素主要從糞便排出［27］，而靜脈注射后葛根素的排泄途徑主要為尿液［28］。

5 研究展望

近年來藥代動力學在中藥領域有了較快的發展，研究方法主要為血藥濃度法和生物效應法。血藥濃度法通過研究中藥代表成分的藥動學來反映中藥整體的藥動學特征，該方法對于有效成分不確切的中藥，難免存在著局限性；生物效應法雖然能從整體上反應中藥的效應特征，但無法很好反映其內在物質基礎。而以血藥濃度為指標的藥動學與以生物效應為指標的藥效學相關性研究，是在藥效法研究的同時，進行有代表性有效成分血藥濃度的測定，建立中藥有效成分藥動學-藥效學同步分析統一模型，則能相對改善上述兩種方法的局限性。

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