本試驗觀察了二十五味松石膠囊對肝臟的保護作用。觀察的內容：1．四氯化碳（ＣＣＬ４）急性中毒小鼠血清總蛋白（ＴＰ）、谷丙轉氨酶（ＳＧＰＴ）、肝組織核糖核酸（ＲＮＡ）、脫氧核糖核酸（ＤＮＡ）和糖元含量；2、溴磺酞鈉（ＢＳＰ）排泄試驗；3、復合致病因子所致肝脂變大鼠血清ＳＧＰＴ、ＴＰ、白蛋白（ＡＬＢ）、白蛋白球蛋白比值（Ａ／Ｃ）、甘油三脂（ＴＧ）、總膽固醇（ＴＣ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ－Ｃ）肝組織總脂、蛋白質、ＲＮＡ、ＤＮＡ、糖元含量及病理變化；4、復合致病因子所致肝硬化大鼠血清ＳＧＰＴ、ＴＰ、ＡＬＢ、Ａ／Ｇ、ＴＧ、ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃ、肝組織總脂、蛋白質、ＲＮＡ、ＤＮＡ、糖元、羥脯氨酸含量和病理變化。現將結果報告如下：

材料

一、藥物：二十五味松石膠囊（25ＷＳＳＨ），由佛閣藏藥有限公司提供，批號980808；藏茵陳膠囊（ＺＹＣＨＮ），青海大地藥業有限公司提供，批號970616，用時將其內容物以ＮＳ配成混懸液；聯苯雙脂（ＢＦＤ），上海天平制藥廠生產，批號978005Ｆ。

二、動物：ＫＭ小鼠，體重18－22ｇ；Ｗｉｓｔａｒ大鼠，體重120－150ｇ，雌雄皆用，蘭州醫學院動物室提供，合格證號：醫動字14－005（小鼠）；14－006（大鼠）

方法與結果

一、對小鼠ＣＣＬ４中毒的影響

取小鼠60只，隨機分為6組，設正常生理鹽水（ＮＳ）組、模型ＮＳ組、兩個25ＷＳＳＨ給藥組、ＢＦＤ對照組和ＺＹＣＨＮ對照組。各用藥組和模型ＮＳ組動物按10ｍｇ／ｋｇ分別ｉｐ0.2%ＣＣＬ4花生油溶液，正常ＮＳ組ｉｐ等是花生油。各用藥組于中毒前24ｈ及中毒同時分別ｉｇ25ＷＳＳＨ0.8ｇ／ｋｇ（人用量40倍）、25ＷＳＳＨ0.2ｇ／ｋｇ體重（人用量10倍）、ＢＥＤ0.04ｇ／ｋｇ，ＺＹＣＨＢ0.6ｇ／ｋｇ體重，正常ＮＳ組和模型ＮＳ組ｉｇ等容量ＮＳ，隨即禁食，但不禁水，16ｈ再給藥一次，1ｈ后各組動物斷頭取血和肝組織，3000ｒｐｍ離心20ｍｉｎ，分離血清，測ＳＧＰＴ（動態法）、ＴＰ（雙縮脲法）。ＮＳ充分沖洗肝臟，濾紙吸干并準確稱取0.5ｇ，另蒸餾水2ｍｌ，制成組織勻漿，4000ｒｐｍ離心15ｍｉｎ，取上清液，測1ｇ肝重中ＲＮＡ、ＤＮＡ（定糖法）1和糖元含量。結果表明，25ＷＳＳＨ能使ＣＣＬ4中毒小鼠血清ＳＧＰＴ降低，但其作用不及ＢＦＤ。該藥還能提高ＣＣＬ4中毒小鼠肝組織總蛋白、糖元和ＲＮＡ含量，但對ＤＮＡ含量無影響。揭示，25ＷＳＳＨ具有減輕ＣＣＬ4對小鼠肝臟急性損傷的作用。

二、對ＣＣＬ4急性中毒小鼠溴磺酞鈉（ＢＳＰ）排泄的影響

取小鼠60只，隨機分成6組，組別和劑量同前。各組每日ｉｇ一次，連續7日。末次給藥后12ｈ，除正常ＮＳ組外，其它各組動物均ｉｐ0.1%ＣＣＬ4花生油溶液10ｍｌ／ｋｇ，16ｈ后全部由尾ｉｖＢＳＰ200ｍｇ／ｋｇ，20ｍｉｎ后斷頭取血，分離血清，取0.1ｍｌ血清加0.01ｍｏｌ／Ｌ鹽酸5ｍｌ，島津ＵＶ－120－02分光光度計（波長524ｍｍ）比色（蒸餾水凋零），然后另2ｍｏｌ／ＬＮａＯＨ溶液一滴，搖勻后比色，以兩次光密度讀數之差計算ＢＳＰ的潴留量（ｎｇ／0.1ｍｌ血清）3。結果表明，25ＷＳＳＨ能促進ＣＣＬ4急性中毒小鼠肝ＢＳＰ排泄作用，其0.8ｇ／ｋｇ劑量的作用較ＢＦＤ強。

三、對大鼠實驗性肝脂肪變性的影響

取大鼠48只，隨機分為6組，分組和給藥劑量同前，除正常ＮＳ組外，各組動物均單純用玉米粉（前兩周加豬油20%），混以0.5%膽固醇喂飼，30%乙醇為唯一飲料，試驗第一天皮下注射ＣＣＬ40.5ｍｌ／100ｇ體重，以后每隔三天皮下注射40%ＣＣＬ4橄欖油溶液0.3ｍｌ／100ｇ體重，正常ＮＳ組皮下注射等容量橄欖油。試驗第2天開始ｉｇ給藥4周（正常ＮＳ組和模型ＮＳ組ｉｇ等容量ＮＳ），末次給藥后24ｈ，快速斷頭取血和肝組織4，同上法分離血清和制成肝組織勻漿上清液，測血清ＳＧＰＴ、ＴＰ、ＡＬＢ、Ａ／Ｇ；用酶法測定甘油三脂（ＴＧ）、總膽固醇（ＴＣ）、高密度脂蛋白（ＨＤＬ－Ｃ）、低密度脂蛋白（ＬＤＬ－Ｃ）和肝組織中總脂、蛋白質、ＲＮＡ、ＤＮＡ及糖元含量。

實驗說明，25ＷＳＳＨ能降低性肝脂肪變性大鼠血清ＳＧＰＴ，能提高血清ＴＰ、ＡＬＢ和Ａ／Ｇ，且0.8ｇ／ｋｇ劑量對ＡＬＢ的作用較ＢＦＤ強。25ＷＳＳＨ還能降低血清ＴＧ，且0.8ｇ／ｋｇ劑量的作用較明顯，但對ＴＣ、ＨＤＬ－Ｃ、ＬＤＬ－Ｃ，無明顯作用；能降低肝組織總脂，能提高肝組織糖元，ＲＮＡ和ＤＮＡ含量，0.8ｇ／ｋｇ劑量還能提高肝組織蛋白質含量，其作用，除肝組織ＤＮＡ含量外，均較ＢＦＤ明顯。

四、對大鼠實驗性肝硬化的影響

取大鼠60只，分組處理和給藥方法同三。不同的是觀察時間延長至8周，以形成肝硬化模型，并增加肝羥脯氨酸含量測定（5）。

實驗結果表明，25ＷＳＳＨ能使實驗性肝硬化大鼠血清ＳＧＰＴ降低；能提高血清ＴＰ、ＡＬＢ和Ａ／Ｇ，且這些作用均較ＢＦＤ強；能降低血清ＴＧ和ＨＤＬ－Ｃ，對ＴＣ和ＬＤＬ－Ｃ無明顯作用。25ＷＳＳＨ0.8ｇ／ｋｇ能使肝組織總脂升高，并能提高肝組織蛋白質、ＲＮＡ和ＤＮＡ含量，對ＲＮＡ的作用比ＢＦＤ的作用強，還能降低肝組織羥脯氨酸含量，且兩個劑量組之間有顯著差別；其0.8ｇ／ｋｇ劑量的作用也比ＢＦＤ的作用強；能提高糖元含量，且其作用亦明顯優于ＢＦＤ。 五、肝組織病理檢查

試驗二、三結束時，在各組所取的肝右葉初取約0.4ｃｍ厚肝組織，4%甲醇固定，石蠟切片，ＨＥ染色，光鏡觀察，并拍攝照片。觀察發生肝脂肪變性、顆粒變性、嗜酸性變、肝細胞壞死、炎細胞浸潤及纖維增生而形成結節等的例數并計算占本組動物數的百分式（例數／動物數％）。結果表明，在實驗性肝脂肪變性試驗中，模型ＮＳ組中脂肪變性、顆粒變性、嗜酸性變例數均多于用藥各組，且程度也較重；各組未見肝細胞壞死，炎細胞浸潤各組差別亦不大。在實驗性肝硬化的試驗中，模型ＮＳ組顆粒變性、脂肪變性、嗜酸性變和由于纖維增生及結節狀再生所形成的例數均多于用藥各組，其中23ＷＳＳＨ0.8ｇ／ｋｇ組和ＺＹＣＨＮ組動物肝中未見結節形成。

結論

25ＷＳＳＨ可降低ＣＣＬ4所致的急性中毒小鼠血清ＳＧＰＴ、提高ＴＰ、肝組織中ＲＮＤ和糖元含量，還能促進ＢＳＰ排泄，對復合致病因子引起的肝脂肪變性及肝硬化具有提高血清總蛋白，白蛋白和Ａ／Ｇ比值，血清ＳＧＰＴ、肝組織總脂質及羥脯氨酸，增加蛋白質、ＲＮＡ、ＤＮＡ和糖元含量的作用。此外還能降低血清甘油三脂，藥用8周后，也有高密度脂蛋白膽固醇的作用。病理結果顯示25ＷＳＳＨ能抑制肝脂肪變性和纖維增生。