肺炎鏈球菌是一種可以引起人類患病的條件致病菌，該菌屬于鏈球菌科的鏈球菌屬，又稱肺炎鏈球菌。肺炎鏈球菌主要寄生于人類上呼吸道的口腔鼻咽部，作為正常菌群存在爿:不引起疾病，當機體免疫力下降時，可引起大葉肺炎化膿性腦膜炎中耳炎+心內膜炎等甚至敗血癥。肺炎鏈球菌引起的腦膜炎在細菌性腦膜炎中死{:率最高，為19%，是常見的機會致病芮。長期以來，由于肺炎鏈球菌生存條伺:較高，屬兼性厭氧菌，又可產生自溶酶，菌落形態與甲型鏈球菌相似，因此檢測時有誤檢和漏檢現象。近年來，隨著分離和鑒定技術的不斷完善，對肺炎鏈球菌的檢出卒逐年提高，而且耐藥率也逐年上升，這與肺炎鏈球菌的分離鑒定刀:平及濫用抗生素有關，現將我院檢出的肺炎鏈球苗185株的分布病原分離鑒定及耐藥性分析如下：?

1 臨床資料

1.1 發病情況 標本來源于吉林大學白求恩醫學院附屬醫院，門診及住患者185株肺炎鏈球菌陽性標本，年齡最小2歲，最大71歲，平均年齡37歲，以兒童及老年人居多。其中痰培養108株(58%)，腦脊液培養23抹(1:%)，其他部位膿性分泌物49株(30%)，全部病兩均川1—2種廠·譜抗生素治療，同時配合輔助使用過糖皮質激素。?

1.2 臨床表現及實驗室檢測 患者均有化膿性感染病灶，高熱.體溫28—40T;白細胞數，12-23×109/L，分類:中性粒細胞60%—90%，有呼吸道癥狀感染者，咳鐵銹包痰或黃色膿性痰，化膿性腦膜炎患者腦脊液呈黃色，潘氏反應(++++)，細胞數，>1000×106/L:分類:中性粒細胞80%—90%，葡萄糧降底，<1.5mmom/L。?

1.3 儀器和試劑 微生物分析儀為生物梅里埃生產的Vitek-2，乏敏培養基及藥敏紙片坫由北京藥物技術開發部提供CO2培養箱由上海一恒科技有限公司生產血液分析儀為日本生產的Sysmex-XT-2000全自動血液分析儀生化分析儀為日本生產的AU640?

2 實驗室檢查

2.1 鏡檢 取純培養物涂片革蘭氏染色及莢膜染色鏡檢發現:該菌為革蘭氏陽性球菌成雙排列，呈矛頭狀，鈍端相對，尖端相背，有較寬的莢膜?可初步報告找到革蘭氏陽性雙球菌，疑似肺炎鏈球菌?

2.2 莢膜腫脹試驗 先將痰液置于鹽水中洗滌，以除去唾液，膿液或腦脊液可直接進行試驗，直接涂片發現有疑似肺炎鏈球菌時，可將標本少許置于玻片上，加少量未稀釋的肺炎鏈球菌抗血清混勻，再滴加少量美藍混合，口蓋玻片，以油鏡檢查，若莢膜顯著腫大，菌體周圍有一無色寬的環狀帶，菌體無變化，且染成藍色，此即莢膜腫脹試驗陽性，可初步確定為肺炎鏈球菌

2.3 分離鑒定 取鐵銹色或膿性痰或化膿性腦膜炎的腦脊液及其他部位化膿性分泌物接種于血平板中，于35℃二氧化碳培養箱中培養18—24h，可形成細小，圓形，表面光華，灰白色，半透明，直徑約為0.5—1.5mm的菌落，在菌落周圍有草綠色溶血環，菌落開始為扁平，培養較久后，由于細菌自溶現象，中心塌陷，邊緣隆起，呈臍窩狀，可再一步確定為肺炎鏈球菌。

2.4 生化反應 將純培養物接種于微量生化管中， 37～C培養lg—24 l該菌可發酵葡萄糖，乳糖麥芽糖，和蔗糖產酸不嚴氣，大多新分離的菌株能分解葡萄糖(亦有少量不分解者)，不液化明膠，不產生吲哚，對于乳發酵不定，不能在6.5%NaG肉湯中生長，可產生自溶酶膽汁膽鹽或表面活性物如皂角苷等，可加速其自溶作用，促使其在短期內自溶，幾乎所有該菌對Optoehin敏感，可進一步確定為肺炎鏈球菌。?

2.5 動物致病試驗 取分離株18h肉湯培養物0.1—0.5汕注入18—20 9健康的小白鼠腹腔或皮下，有毒力的肺炎鏈球菌可使小白鼠在接種4—Sh出現癥狀，18—24h因敗血癥而死亡，作心血培養可獲純種細菌，用心血或腹腔液作涂片，革蘭氏染色，可見典型有莢膜C陽性雙球菌。? 2.6 藥物敏感試驗 采用WHO推薦(NCCL～)制定標準(2001年版)進行藥敏試驗。? 3 結果

3.1 肺炎鏈球菌的來源分布 兩年來我院從患者呼吸道腦脊液及其他部位感染性分泌物中檢出 185株，呼吸道108(58%)，腦脊液23株(12%)，其他部位感染49株(30%)，表明肺炎鏈球菌是引起人類感染性疾病的重要病原菌。?

3.2 肺炎鏈球菌的藥敏結果 對所分離的185株肺炎鏈球菌進行11種抗菌藥物的藥敏試驗測定，其耐藥陽性率見表1。?

表1 （185株）不同來源肺炎鏈球菌的耐藥率（%）

注：青霉素（PNE）氨芐青霉素/舒巴坦（SAM）萬古霉素（VAN）頭孢曲松 環丙沙星 阿卡星 左氧沸沙星(LVX)紅霉素（ERY）四環素（TET）利福平（RIF）氯霉素（CHL）。

4 討論

本研究顯示，肺炎鏈球菌是人體感染性疾病重要的病原菌，分布比較廣泛，本資料顯示，上呼吸道檢出占58%，腦脊液檢出占12%，其他部位30%肺炎鏈球菌是人體感染性疾病不可忽視的病原菌，在疾病的診治中應注意其分離鑒定，由于肺炎鏈球菌有比較厚的莢膜，因此具有較強的耐藥性，藥敏結果顯示，多種抗菌藥物的耐藥牢明顯上升，特別是對青霉崇G的耐藥宰由報道的4.8%—9.7%上升到25.4%。有些菌株除對青C耐藥外，對四環素，紅霉素.氯霉素，環丙沙星，利福平，頭孢曲松，頭孢塞肟等產生多重耐藥㈠j?肺炎鏈球菌的主要耐藥機制是 PBP發生改變，使青霉素C結合力下降，肺炎鏈球菌的高耐株常對廣譜頭孢菌素，頭孢塞肟，頭孢曲松亦同時耐藥，并且有逐年上升趨勢?因此加強對肺炎鏈球菌分用鑒定及耐藥譜的檢測有重要意義。