作者：朱雯怡范躍祖閻波包炎毅侯坤

【摘要】 ［目的］ 探討結(jié)腸旁植入氟尿嘧啶緩釋劑化療的藥代動力學(xué)變化及其意義。［方法］ 健康成年雜種犬25只分為實驗組（20只）和對照組（5只）。手術(shù)經(jīng)腹乙狀結(jié)腸旁單點植入氟尿嘧啶緩釋劑（中人氟安）200mg，門靜脈留置插管。按不同時段取距植藥點不同距離的組織、不同站點的淋巴結(jié)以及外周、門靜脈血樣，HPLC法檢測藥物濃度。［結(jié)果］ 植藥點局部組織和淋巴結(jié)藥物濃度以植藥點為中心隨距離增加濃度遞減；門靜脈、局部組織及淋巴結(jié)的藥物濃度隨著植藥時間的延長遞減；植藥后15天，距植藥點15cm處組織濃度為0.101±0.015μg/g，腸系膜淋巴結(jié)濃度為0.204±0.059μg/g，門靜脈內(nèi)藥物濃度0.102μg/ml，均大于抑瘤濃度(0.1μg/ml)。［結(jié)論］ 結(jié)腸旁植入氟尿嘧啶緩釋劑化療能使局部組織、淋巴結(jié)以及門靜脈血持久維持較高的有效藥物濃度，可作為預(yù)防和治療結(jié)直腸癌術(shù)后局部復(fù)發(fā)和肝轉(zhuǎn)移的一種有效的輔助化療手段。

【關(guān)鍵詞】 結(jié)直腸腫瘤植入化療氟尿嘧啶緩釋劑藥代動力學(xué)

Abstract: ［Purpose］ To explore the pharmacokinetics and its significance of chemotherapy via para-colon approach implanted with sustained-release preparation 5-fluorouracail. ［Methods］ Twenty-five adult hybrid dogs were pided into two groups(chemotherapy group，20 dogs; control group， 5 dogs). Sustained-release preparation 5-fluorouracail(Zhong Ren Fu An， 200mg) was imbedded at one point in para-sigmoid colon via abdomen operation. A pipe was inserted into portal vein for collecting blood samples. At different time points， tissue samples in different distance from the imbed point and different lymphoid node and blood samples from periphery and portal vein were collected to be taken for drug concentration measurement in HPLC method. ［Results］ The drug concentration of local tissue and different lymphoid node decreased gradually at distance increase around the imbed point. The drug concentration of portal vein， local tissue and lymphoid node also decreased at time prolong. At 15 days point， drug concentration of tissue 15cm away from imbed point(0.101±0.015μg/g)，mesentery lymphoid node(0.204±0.059μg/g) and portal vein（0.102μg/ml）were all more than treatment concentration(0.1μg/ml). ［Conclusions］ The chemotherapy of via para-colon approach implanted with sustained-release preparation 5-fluorouracail may maintain lasting， effective and high concentration in tissue， lymphoid node and portal vein. It is an effective and secondary chemotherapy of prevention and treatment for local recurrence and live metastasis in postoperative patients with colon-rectum cancer.

Key words: colorectal neoplasms; implant chemotherapy; fluorouracil; sustained-release preparations;

pharmacokinetics

結(jié)直腸癌（colorectal cancer，CRC）患者的5年生存率僅為50％左右，局部復(fù)發(fā)和肝轉(zhuǎn)移是預(yù)后不良的主要原因[1]。臨床上采用的腸腔化療、腹腔化療及門靜脈灌注化療等[2]區(qū)域性化療方法，雖然提高了局部有效藥物濃度，減少了全身毒副反應(yīng)，但有效藥物濃度維持時間短，限制了療效的發(fā)揮。近幾年來，緩釋化療藥物的出現(xiàn)，為植入化療療效的充分發(fā)揮提供了技術(shù)支持，臨床逐漸開始應(yīng)用，但其藥代動力學(xué)尚有待于進(jìn)一步研究。本研究通過動物實驗，經(jīng)腹植入緩釋氟尿嘧啶（中人氟安），觀察藥物在組織和血液中的藥代動力學(xué)，探討局部植入化療預(yù)防和治療結(jié)直腸癌術(shù)后復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移的可行性。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

實驗用植入化療藥為氟尿嘧啶緩釋劑型（中人氟安，規(guī)格100mg/瓶，蕪湖中人藥業(yè)有限責(zé)任公司生產(chǎn)）。皮下埋藏灌注器（KG-Ⅰ，河北科光醫(yī)療器械公司）；P200-Ⅱ型高效液相色譜儀/WDL95色譜工作站(大連依利特科學(xué)儀器公司)。色譜條件，流動相：甲醇—水(5∶95，V/V)；流速：0.8～1.0ml/min；檢測器：紫外分光光度計，檢測波長：266nm。XW-80A型旋渦混合器；LXJ-Ⅱ離心沉淀機(jī)；PT-MR2100組織勻漿機(jī)。

1.2 動物實驗

健康成年雜種犬20只（由安徽醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供），平均體重(10±2)kg，雌雄不分。分籠飼養(yǎng)2周。

實驗前24h禁食，自由飲水，以3% 戊巴比妥鈉（30mg/kg）腹腔麻醉，上腹正中切口入腹。門靜脈留置導(dǎo)管，置管灌注器固定于皮下，備取血。結(jié)腸旁單點植入中人氟安200mg，并分別于12、24、36、72、96、120、144、240、360h抽取外周及門靜脈血各2.5 ml。在植藥后3、5、7、10、15天分別處死4只，以植藥點為中心，分別距植藥點0、3、5、7、10、15cm處取組織樣及腸系膜根部各站點的淋巴結(jié)(重量≥0.5g)，分別密封。所有取樣-5℃以下保存，7天內(nèi)上機(jī)檢測藥物濃度。

1.3 藥物濃度檢測

采用高效液相色譜儀檢測組織及血樣藥物濃度。取組織樣品適量，切碎成肉糜狀，稱取0.5g，置10ml具塞離心試管內(nèi)，加5-溴尿嘧啶（5-Bru約500μg/ml)溶液0.20ml，加NaOH溶液1.0ml； 勻漿，勻漿后加入HCl溶液1.0ml，渦漩混勻。以3000r/min離心30min，分取上清液0.50ml于另一10ml具塞試管中。向上清液中加硫酸銨((NH4)2SO4)0.10g，渦旋混勻。再加入乙酸乙酯4.0ml，渦旋3min，離心(3000r/min)10min，將上層液體吸移至另一試管中。殘渣再用乙酸乙酯4.0ml，仿前操作，進(jìn)行第二次提取，合并兩次提取液。于溫度≤30℃的真空干燥器中抽干，得殘渣試樣。將殘渣試樣以100μl流動相溶解后，經(jīng)0.22μm過濾膜，濾過，即得供試液。用20μl定量環(huán)將供試液20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。再按同樣的方法配制以空白組織為基體的生物標(biāo)準(zhǔn)樣系列并測定，做出標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1.4 數(shù)據(jù)處理及統(tǒng)計分析

以高效液相色譜檢測的組織和血樣藥物含量的峰面積，代入回歸方程，求得藥物濃度。所有數(shù)據(jù)采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件處理。藥物濃度以Mean±SD表示，結(jié)果與抑瘤濃度(0.1μg/ml)[3]比較，高于抑瘤濃度為有效藥物濃度。

2 結(jié) 果

2.1 門靜脈及外周血藥濃度

中人氟安植入后，門靜脈血藥濃度隨著植藥時間的延長逐漸降低。植藥后15天內(nèi)，門靜脈血藥濃度均高于抑瘤濃度，最高濃度達(dá)0.247±0.032μg/ml（表1，圖1）。外周血則未檢測到藥物濃度。

2.2 植藥點周圍組織藥物濃度

如表2所示，中人氟安植入后，距植入點0～15cm范圍內(nèi)各點藥物濃度隨著距離增加而降低；各點藥物濃度亦隨時間延長而遞減，但植藥后15天內(nèi)各點藥物濃度均高于抑瘤濃度。

2.3 距植藥點不同距離淋巴組織藥物濃度

犬腸系膜內(nèi)植入中人氟安后，距離植入點不同距離的淋巴結(jié)藥物濃度隨著離植入點距離增加，藥物濃度逐漸遞減；同一點藥物濃度隨時間延長亦逐漸遞減，但在植藥后15天內(nèi)藥物濃度均高于抑瘤濃度（表3）。

3 討 論

近年來，隨著抗腫瘤藥物緩釋劑型的技術(shù)改進(jìn)，區(qū)域性化療——腹腔內(nèi)化療、腸腔內(nèi)化療、瘤動脈灌注化療、門靜脈灌注化療、間質(zhì)植入化療等方法，日益成為治療惡性實體瘤的有效輔助手段[4]。研究表明[5]，腹腔內(nèi)給予大劑量的抗癌藥物，能提高腹腔內(nèi)、門靜脈及肝臟中的藥物濃度，并能延長一定的時間，有利于殺滅腹腔內(nèi)亞臨床病灶。Archer等[6]應(yīng)用腹腔內(nèi)注入5-Fu，能有效地殺滅腹膜表面的微小病灶。但普通化療藥物代謝較快，有效藥物濃度維持較短，難以達(dá)到持續(xù)的殺傷療效。

控緩釋藥物系統(tǒng)的發(fā)展為植入化療提供了更有效、更合理的給藥途徑[7]。該方法可以使植入腫瘤周圍的抗癌控緩釋藥物，緩慢、恒速、持續(xù)、穩(wěn)定地釋放，在瘤床及周圍毗鄰組織形成較高的有效抑瘤濃度，增加化療藥物對腫瘤細(xì)胞的直接毒性作用，從而更持續(xù)、有效地殺滅腫瘤細(xì)胞，并有效降低全身毒副反應(yīng)。目前，已在臨床取得了良好的療效[8]。本實驗中人氟安緩釋藥物門靜脈血藥濃度48小時達(dá)到高峰（0.247±0.052μg/ml），高于有效抑瘤濃度2倍之多；組織藥物濃度以植入點部位濃度最高（75.119μg/g），依距離遞減，距植入點15cm處仍有較高的藥物濃度（0.172±0.103μg/g）；淋巴結(jié)的有效藥物濃度亦依植藥點距離遞減。本結(jié)果表明，緩釋化療藥經(jīng)腹腔植入化療，可以在局部組織及門靜脈系統(tǒng)形成并維持較高的、有效的藥物濃度，時間長達(dá)15天之久；植藥點旁淋巴結(jié)濃度最高，距植藥點20cm處淋巴結(jié)15天后亦能測得有效濃度。提示緩釋植入化療可以殺滅腹腔、門靜脈系統(tǒng)及淋巴系統(tǒng)內(nèi)微小的復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移灶，是預(yù)防和治療結(jié)直腸癌術(shù)后腹腔內(nèi)區(qū)域復(fù)發(fā)和肝轉(zhuǎn)移的一種有效、安全、可行的輔助治療手段。緩釋植入化療是目前惡性實體腫瘤化療的發(fā)展趨勢。

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